[发明专利]子宫内膜来源的外分泌体miRNA在胚胎着床中的应用

说明书

本发明公开了子宫内膜来源的外分泌体miRNA在胚胎着床中的应用，包括以下步骤：步骤A、小RNA测序：通过小白鼠固定装置3将受孕小白鼠进行固定，之后对小白鼠进行处死；步骤B、分析受孕小白鼠妊娠miRNA的变化；步骤C、假孕模型验证miRNA的作用功能；步骤D、延时着床模型与延时着床激活模型验证miRNA的作用功能；步骤E、对miRNA作为抑制胚胎着床的药物在小鼠体内进行效果探究；所述步骤A中的小白鼠自动固定设备包括固定装置；所述固定装置包括鼠脚拉平组件；通过设置了鼠脚拉平组件,对小白鼠的四肢进行固定，并向四周拉动四肢，从而使小白鼠处于趴下的状态，使小白鼠无法进行挣脱从而提高对子宫内膜来源的外分泌体miRNA效果测试的准确性。

技术领域

本发明属于miRNA应用技术领域，尤其是涉及子宫内膜来源的外分泌体miRNA在胚胎着床中的应用。

背景技术

miRNA在机体内的脾脏、肾脏及肝脏中具有较高的表达量。近期，有研究表明，人源的miRNA与鼠源的miRNA的一致性达到了100％，因此可以选择小鼠为模式动物，进行miRNA对胚胎着床影响的研究，开发抑制或促进胚胎着床的药物；但是在现有的实验中需要对小白鼠进行固定，之后在小白鼠体内进行提取相应的实验物，但是在提取过程需要用手对小白鼠进行固定，由于人的手大小不一，所以不能保证每一个实验人员都可以很好的将小白鼠固定住，从而会影响对小白鼠进行取样的稳定性，之后小白鼠本身也难以对其进行固定，从而会使小白鼠固定的效果不好，从而在取样时会导致取样数据不准确的现象。

发明内容

本发明为了克服现有技术的不足，提供一种在子宫内膜来源的外分泌体miRNA试验的过程中可以更好的将小白鼠进行固定，提高外分泌体miRNA效果的测试稳定性和准确性的子宫内膜来源的外分泌体miRNA在胚胎着床中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：子宫内膜来源的外分泌体miRNA在胚胎着床中的应用，包括以下步骤：

步骤A、小RNA测序：选取发情的母鼠与公鼠进行合笼，母鼠受孕，之后通过小白鼠自动固定设备将受孕小白鼠进行固定，之后对小白鼠进行处死，以及提取组织miRNA；对测序结果找出在着床窗口期起关键作用的miRNA，在胚胎着床过程中，主要观察mmu-miR-192-5p在着床前后的变化；

步骤B、分析受孕小白鼠妊娠miRNA的变化；主要对第一天到第七天的miR-192-5p的变化趋势进行记录和分析。

步骤C、假孕模型验证miRNA的作用功能；在假孕模型中，在没有胚胎存在的情况下，与妊娠第一天相比，子宫内膜中mmu-miR-192-5p出现的现象变化；

步骤D、延时着床模型与延时着床激活模型验证miRNA的作用功能；对延时模型与延时激活模型的数据结果进行分析，主要证实在胚胎着床时，着床事件是导致mmu-miR-192-5p发生变化的原因

步骤E、对miRNA作为抑制胚胎着床的药物在小鼠体内进行效果探究。。