[发明专利]同时测定抑菌纸张中五种禁限用物质含量的方法及其用途

权利要求书

1.一种同时测定抑菌纸张中五种抑菌禁限用物质含量的方法，其特征在于，所述五种抑菌禁限用物质为卤卡班、三氯卡班、三氯生、六氯酚和三溴沙仑五种目标化合物，所述方法包括以下步骤：

步骤S1，同时含五种抑菌禁限用物质的系列混合标准工作溶液的配制：使用80％vol的甲醇水溶液配制同时含卤卡班、三氯卡班、三氯生、六氯酚或三溴沙仑的系列混合标准工作溶液；

对同一混合标准工作溶液而言，卤卡班、三氯卡班、六氯酚和三溴沙仑的浓度相同，三氯生的浓度为卤卡班、三氯卡班、六氯酚和三溴沙仑对应浓度的8-12倍；

步骤S2，样品前处理：裁切抑菌纸张样品得到试样，试样应包含一个单边；将裁剪下来的试样剪成0.5cm×0.5cm的碎片，混合均匀，置于干净的密封袋中待用；称取待测试样，置于具塞三角瓶中，加入色谱纯甲醇V mL，超声提取20～40min；静置3～7min，移取2～3mL萃取液于离心管中，离心3～7min；移取1mL上清液，经0.22μm有机相滤膜过滤，获待测样品滤液，待超高效液相色谱-电喷雾电离源四极杆质谱检测；

步骤S3，空白实验：在不加待测纸张样品的情况下，执行步骤S2，获待测空白样品滤液，待超高效液相色谱-电喷雾电离源四极杆质谱检测；

步骤S4，标准工作曲线的绘制：通过采用超高效液相色谱-电喷雾电离源四极杆质谱测定步骤S1所述系列混合标准工作溶液中各目标化合物的峰面积，以每个目标化合物的浓度为横坐标，该目标化合物的峰面积为纵坐标，进行线性回归以绘制标准工作曲线；

步骤S5，样品中各目标化合物的含量测定：采用超高效液相色谱-电喷雾电离源四极杆质谱测定S2所述待测样品滤液中各目标化合物的峰面积，并根据步骤S4所述标准工作曲线计算所述待测样品滤液中各目标化合物的浓度C；

步骤S6，空白样品中各目标化合物的含量测定：采用超高效液相色谱-电喷雾电离源四极杆质谱测定S3所述待测空白样品滤液中各目标化合物的峰面积，并根据步骤S4所述标准工作曲线计算所述待测空白样品滤液中各目标化合物的浓度C₀；

步骤S7，抑菌纸张样品中各目标化合物含量的结果计算：根据以下公式计算待测抑菌纸张样品中各目标化合物的含量；

式中，

X表示待测抑菌纸张样品中各目标化合物的含量，单位为μg/kg；

C表示由标准工作曲线得出的待测样品滤液中对应目标化合物的浓度，单位为ng/mL；

C₀表示由标准工作曲线得出的待测空白样品滤液中对应目标化合物的浓度，单位为ng/mL；

V表示萃取液的体积，单位为mL；

m表示待测抑菌纸张样品的质量，单位为g；

∫表示稀释因子；若待测试样溶液中目标化合物的浓度未超出混合标准工作溶液最大浓度，则稀释因子取1；若待测试样溶液中目标化合物的浓度超出混合标准工作溶液最大浓度，则应将待测液用甲醇调整稀释后再测定，若稀释至2倍，则稀释因子取2，以此类推；

以多次平行测定结果的算术平均值为最终测定结果，精确至0.01μg/kg；

多次平行测量结果的相对平均偏差应小于10％；

步骤S1中，使用80％vol的甲醇水溶液配制同时含卤卡班、三氯卡班、三氯生、六氯酚和三溴沙仑的系列混合标准工作溶液；其中，卤卡班、三氯卡班、六氯酚和三溴沙仑的浓度分别为：2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、30ng/mL、50ng/mL、70ng/mL、100ng/mL、150ng/mL、200ng/mL；三氯生的浓度为卤卡班、三氯卡班、六氯酚和三溴沙仑对应浓度的8-12倍；即三氯生的浓度分别为16～24ng/mL、40～60ng/mL、80～120ng/mL、240～360ng/mL、400～600ng/mL、560～840ng/mL、800～1200ng/mL、1200～1800ng/mL、1600～2400ng/mL；

在所述步骤S4、所述步骤S5和所述步骤S6中，超高效液相色谱-电喷雾电离源四极杆质谱方法的液相色谱条件包括：色谱柱为100mm×2.1mm，1.8μm的ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱；进样量为5μL；流速为0.3mL/min；柱温为40℃；进样器温度为20℃；流动相A为甲醇，流动相B为0.1％vol甲酸水溶液；梯度洗脱条件包括：0～1.0min，流动相A的占比为80％vol～85％vol；1.0～2.0min，流动相A的占比为85％vol；2.0～4.0min，流动相A的占比为85％vol～90％vol；4.0～6.0min，流动相A的占比为90％vol；6.0～6.5min，流动相A的占比为90％vol～100％vol；6.5min～7.0min，流动相A的占比为100％vol～80％vol；7.0min～8.0min，流动相A的占比为80％vol；

在所述步骤S4、所述步骤S5和所述步骤S6中，超高效液相色谱-电喷雾电离源四极杆质谱方法的质谱条件包括：离子源为电喷雾电离源；扫描方式为负离子扫描；毛细管电压为3kV；萃取锥孔电压为5V；RF射频质谱电压为0.5V；离子源温度为120℃；脱溶剂气为氮气，纯度不小于99.99％；脱溶剂气温度为500℃；脱溶剂气流量为600L/hr；碰撞气为氩气；碰撞室压力为3.80e^-3mbar；光电倍增管电压为650V；检测方式为多反应监测；离子对的驻留监测时间为50ms；

在所述步骤S4、所述步骤S5和所述步骤S6中，各目标化合物对应的超高效液相色谱-电喷雾电离源四极杆质谱方法的保留时间及多反应监测关键参数详见下表：

注：*为定量离子。

2.一种权利要求1所述的测定抑菌纸张中五种抑菌禁限用物质含量的方法的用途，其特征在于，此方法用于同时快速测定复杂混合体系中的卤卡班、三氯卡班、三氯生、六氯酚和三溴沙仑，检出限为0.01～10.00ng/mL，定量限为0.02～26.00ng/mL。