[发明专利]靶向直向同源物的蛋白

权利要求书

1.鉴定来自一个物种的模板抗体的跨物种突变抗体的方法，其中所述模板抗体对来自所述物种的第一靶表现出活性，并且所述模板抗体具有总共包含n个氨基酸残基的六个互补决定区，所述方法包括以下步骤：

i.生成来自模板抗体的具有n个单独的突变抗体组的库，每组包含在所述六个互补决定区之一的单个预定位置上具有X个不同的预定氨基酸残基的突变抗体；其中每个突变抗体组的所述单个预定位置不同；并且所生成的不同突变抗体的数目等于n×X；

ii.选择对另一物种中所述第一靶的直向同源物表现出活性的突变抗体；以及

iii.筛选所选择的突变抗体以获得对所述第一靶表现出活性的跨物种突变抗体。

2.根据权利要求1所述的方法，其中X为19个氨基酸残基。

3.根据权利要求1所述的方法，其中每个突变抗体组通过在编码所述模板抗体的多核苷酸的预定密码子位置并入Ν,Ν,Ν来生成。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述物种是人。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述另一物种选自大鼠、小鼠、兔、仓鼠、豚鼠、猴、狗、猫和非人灵长类动物。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述物种是选自大鼠、小鼠、兔、仓鼠、豚鼠、猴、狗、猫和非人灵长类动物的非人物种。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述另一物种是选自大鼠、小鼠、兔、仓鼠、豚鼠、猴、狗、猫和非人灵长类动物的非人物种。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述物种和所述另一物种不同且所述物种和所述另一物种独立地选自大鼠、小鼠、兔、仓鼠、豚鼠、猴、狗、猫和非人灵长类动物。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述具有n个单独的突变抗体组的文库在真核细胞生产宿主中表达。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述真核细胞生产宿主是哺乳动物细胞生产宿主。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述哺乳动物细胞生产宿主选自3T3小鼠成纤维细胞；BHK21叙利亚仓鼠成纤维细胞；MDCK，狗上皮细胞；Hela人类上皮细胞；PtK1鼠袋鼠上皮细胞；SP2/0小鼠血浆细胞；NS0小鼠血浆细胞；HEK 293人胚肾细胞；COS猴肾细胞；CHO，CHO-S中国仓鼠卵巢细胞；R1小鼠胚胎细胞；E14.1小鼠胚胎细胞；H1人类胚胎细胞；H9人类胚胎细胞；和PER C.6，人类胚胎细胞。

12.根据权利要求10所述的方法，其中所述哺乳动物细胞生产宿主为GS-NS0细胞或GS-CHOKl细胞。

13.根据权利要求9所述的方法，其中在所述真核细胞生产宿主中使用细胞表面展示表达所述具有n个单独的突变抗体组的文库。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述细胞表面展示是酵母细胞表面展示。

15.根据权利要求13所述的方法，其中所述细胞表面展示是哺乳动物细胞表面展示。

16.根据权利要求9所述的方法，还包括在与所述表达步骤中使用的真核细胞生产宿主相同的真核细胞生产宿主中产生所述突变抗体的步骤。

17.根据权利要求3所述的方法，其中所述预定密码子位置在互补决定区中。