[发明专利]表达人α-乳白蛋白的重组毕赤酵母菌及其构建方法与应用

权利要求书

1.一种表达人α-乳白蛋白的重组毕赤酵母菌，其特征在于，所述的重组毕赤酵母菌在毕赤酵母宿主菌中，异源表达了人α-乳白蛋白，并在人α-乳白蛋白基因前插入α-factor信号肽。

2.根据权利要求1所述的重组毕赤酵母菌，其特征在于，所述的人α-乳白蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求2所述的重组毕赤酵母菌，其特征在于，编码人α-乳白蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.根据权利要求1所述的重组毕赤酵母菌，其特征在于，所述的α-factor信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

5.根据权利要求1所述的重组毕赤酵母菌，其特征在于，所述的人α-乳白蛋白是通过质粒pPICZαA进行异源表达。

6.根据权利要求5所述的重组毕赤酵母菌，其特征在于，所述的质粒pPICZαA的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

7.根据权利要求1所述的重组毕赤酵母菌，其特征在于，所述的毕赤酵母宿主菌为毕赤酵母野生型菌株X33。

8.一种权利要求1～7任一项所述的重组毕赤酵母菌的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：将编码人α-乳白蛋白的基因插入表达载体，并在编码人α-乳白蛋白的基因前，插入α-factor信号肽，得到重组表达载体；将重组表达载体导入毕赤酵母宿主中，得到所述重组毕赤酵母菌。

9.权利要求1～7任一项所述的重组毕赤酵母菌在发酵生产人α-乳白蛋白中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的应用具体是将所述的重组毕赤酵母菌经过两级种子培养之后，接种于发酵培养基中进行诱导发酵。