[发明专利]一种木麻黄鞣宁的制备方法及其降糖用途

权利要求书

1.一种木麻黄鞣宁的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)粗提：以地稔果实为原料，经醇提浓缩、乙酸乙酯萃取、氮吹后得到地稔乙酸乙酯提取物粉末；

(2)高压制备液相色谱分离：将所述地稔乙酸乙酯提取物粉末溶解后注入高压制备液相色谱中，采用C18色谱柱，经流动相进行梯度洗脱，再经后处理得到木麻黄鞣宁提取物冻干粉；

所述流动相：A相为纯乙腈，B相为甲酸体积百分浓度为1.5～5％的甲酸-水体系；

所述梯度洗脱的程序为：A相的体积百分浓度在0～5min内保持5％不变，在5～30min内从5％上升至60％，收集24～26min的洗脱物；

(3)高速逆流色谱分离：以乙酸乙酯-水-三氟乙酸为两相溶剂体系，将所述木麻黄鞣宁提取物冻干粉用流动相溶解后注入高速逆流色谱分离，经分离、冻干后得到木麻黄鞣宁粉末；

所述乙酸乙酯、水和三氟乙酸的体积比为1：1：0.01～0.1。

2.根据权利要求1所述的木麻黄鞣宁的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述醇提浓缩，具体为：

将洗净的地稔果实与酸性乙醇溶液混合，超声提取完全后过滤并收集滤液，滤液在40～50℃下真空旋转蒸发除去乙醇并浓缩，得到地稔提取物粗提液；

所述酸性乙醇溶液为酸的体积百分浓度为0.1～1.5％的乙醇溶液；

所述酸选自盐酸、甲酸、乙酸、柠檬酸中的至少一种；

所述乙醇溶液的体积百分浓度为50～95％；

所述地稔与酸性乙醇溶液的质量体积比为1：5～12g/mL。

3.根据权利要求1所述的木麻黄鞣宁的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述乙酸乙酯萃取，以乙酸乙酯作为萃取剂，萃取若干次后收集乙酸乙酯相，在40～50℃下真空旋转蒸发，氮吹，得到地稔乙酸乙酯提取物粉末。

4.根据权利要求1所述的木麻黄鞣宁的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述高压制备液相色谱分离，具体为：

先将所述地稔乙酸乙酯提取物粉末经DMSO复溶后，再注入高压制备液相色谱仪中进行纯化；

所述复溶后的浓度为10～60mg/mL，进样量为1～3mL；

所述C18色谱柱的规格为20mm×250mm，温度为25～30℃。

5.根据权利要求1所述的木麻黄鞣宁的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述高速逆流色谱分离，具体为：

配制所述两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，以20～30mL/min的流速将所述固定相泵入高速逆流色谱仪中，在25～35℃、主机转速为700～1000r/min的条件下，以1～8mL/min的流速泵入所述流动相，待两相达到平衡后，将所述木麻黄鞣宁提取物冻干粉用流动相溶解后进样，经液相检测后，收集包含目标产物的流出液，再经减压浓缩得到木麻黄鞣宁浓缩液。

6.根据权利要求5所述的木麻黄鞣宁的制备方法，其特征在于，所述两相溶剂系统中，乙酸乙酯、水和三氟乙酸的体积比为1：1：0.01；

以20～30mL/min的流速将所述固定相泵入高速逆流色谱仪中，在25～35℃、主机转速为850～950r/min的条件下，以3～4mL/min的流速泵入所述流动相；

所述木麻黄鞣宁提取物冻干粉用流动相溶解后的浓度为10～30mg/mL，进样体积为1～15mL。

7.一种木麻黄鞣宁在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用，其特征在于，所述木麻黄鞣宁根据权利要求1～6任一所述的方法制备得到。