[发明专利]一种从混合组合化学分子库中垂钓活性小分子的方法

权利要求书

1.一种从混合组合化学分子库中垂钓活性成分单体或活性成分组的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S1，将金属纳米粒子或磁珠活化后与靶蛋白进行耦联，得到可用于组合化学分子库垂钓的探针结构；

步骤S2，将制备好金属纳米粒子探针或磁珠探针，加入至组合化学化合物库中，孵育，进行分子垂钓；

步骤S3，将垂钓后的探针用高浓度甲醇或乙腈充分溶解，上清液冻干后用质谱甲醇复溶，用质谱检测，获得垂钓得到的化合物的分子量和结构信息；

步骤S4，将制备的金属纳米粒子探针或磁珠探针与拉曼信号分子耦联，再将金属纳米粒子探针和磁珠探针分别与靶蛋白或靶蛋白结合受体蛋白耦联，加入S2垂钓筛选出的化合物；

步骤S5，检测拉曼信号，判断所筛选出的化合物是否具有抑制靶蛋白与靶蛋白受体结合的作用；

所述判断具体为：

若检测到SERS信号明显由强变弱或由弱变强，则垂钓筛选出的化合物为针对特定靶点的靶向小分子抑制剂；

若SERS信号没有明显改变，则垂钓筛选出的化合物不是针对特定靶点的靶向小分子抑制剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S2中所述探针与组合化学化合物的体积比例为3:1。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S2中孵育的时间为4h以上或过夜。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3中充分溶解步骤为，金属纳米粒子探针：用乙酸重悬，快速震摇至明显的银镜反应出现，收集上清离心；磁珠探针：用甲醇重悬，均匀反应20min，收集上清离心。

5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述金属纳米粒子探针为金纳米粒子探针或银纳米粒子探针。

6.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述拉曼信号分子为4-MBA或4-ABP。

7.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述靶蛋白为程序性死亡配体1（PD-L1）。