[发明专利]分泌双特异性T细胞衔接子的CAR-T及治疗实体肿瘤的应用

权利要求书

1.一种工程化免疫细胞，包括

(a) 嵌合抗原受体(CAR)多肽，包括与第一肿瘤抗原结合的细胞外结构域，所述抗原在正常组织中表达量低；以及

(b) 双特异性T细胞衔接子，其中所述双特异性T细胞衔接子与第二肿瘤抗原结合；

其中所述第一肿瘤抗原包括Claudin18.2或CEA；

其中所述第二肿瘤抗原包括CEA或NKG2D配体；

所述与第一肿瘤抗原结合的细胞外结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO: 4或SEQ IDNO: 5所示；

所述双特异性T细胞衔接子的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 2或SEQ IDNO: 3所示。

2.根据权利要求1所述的工程化免疫细胞，其中所述CAR包括铰链区和跨膜区，其中所述铰链区和跨膜区的序列包括CD8或CD28的跨膜区或铰链区的序列。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的工程化免疫细胞，其中所述CAR包括细胞内信号区，其中所述细胞内信号区的序列包括选自以下序列中一个或多个：CD3ζ、FcεRIγ、CD27、CD28、4-1BB、CD134、OX40、CD40、CD40L、TLRs、ICOS、DAP10和DAP12的细胞内信号区序列。

4.根据权利要求3所述的工程化免疫细胞，其中与所述第一肿瘤抗原结合的细胞外结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO: 4所示，而所述双特异性T细胞衔接子的氨基酸序列如SEQID NO: 1所示；或者，其中与所述第一肿瘤抗原结合的细胞外结构域的氨基酸序列如SEQID NO: 5所示，而所述双特异性T细胞衔接子的氨基酸序列如SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO:3所示。

5.根据权利要求4所述的工程化免疫细胞，其中所述免疫细胞选自以下一种或多种：原代T细胞、NK细胞、iNKT细胞、IPS诱导的NK细胞、脐带血NK细胞、gamma delta T细胞、TCR敲除T细胞、病毒特异性T细胞和iPSC衍生T细胞。

6.权利要求1-5任一项所述的工程化免疫细胞在制备治疗实体肿瘤的药物中的应用，其中所述实体肿瘤选自CEA阳性肿瘤、Claudin 18.2阳性肿瘤中的一种或两种。

7.根据权利要求6所述的应用，其中所述实体肿瘤选自肝癌、结直肠癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、甲状腺髓样癌、肺癌、卵巢癌和泌尿系统肿瘤中的一种或多种。