[发明专利]一种白花鬼针草染色体常规制片的制作方法

权利要求书

1.一种白花鬼针草染色体常规制片的制作方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

1)根尖预处理培养：先将白花鬼针草种子用清水浸泡二十分钟，浸泡的过程中把种皮外面的黄色物质清洗干净，用镊子挑选出颗粒饱满的白花鬼针草种子放在铺有定性滤纸的培养皿中，把种子有间隔地放在定性滤纸上，每个培养皿中约放25粒饱满的白花鬼针草种子，在培养皿中放入适量的清水，种子上面再铺上一层定性滤纸，放少量的清水，最后将培养皿放入到28℃培养箱培养2-3d，等根尖长到0.25cm时，采用根尖离体的方法进行根尖预处理；

2)染色体制片：经预处理的根尖先用蒸馏水清洗3次，后放入蒸馏水中浸泡十分钟，再转移至解离液中进行解离，解离完成后用蒸馏水清洗3次再用蒸馏水浸泡10分钟；用染色剂进行染色，染色时间为5分钟，染色之后用吸水纸吸干染液，之后用45％醋酸进行分色压片，分色完成之后，用吸水纸吸干染液，然后开始制片，先用手术刀切掉根尖的伸长区部分，留分生区部分，之后在载玻片上面滴一滴清水；然后盖上盖玻片，载玻片上面放一张滤纸，再用镊子轻轻敲打，使染色体均匀分散，将压好的载玻片置于普通光学显微镜下镜检并对染色体进行观察，找出清晰的中期分裂相细胞并进行拍照；

3)预处理：统一在早上8:30对白花鬼针草根尖进行取材，选取萌发至0.25厘米且乳白色无根毛的根尖放入含有预处理试剂的离心管中，25℃黑暗条件下分别用0.002mol/L的8-羟基喹啉浸泡4h进行预处理；

4)解离：取上述经预处理的根尖，在常温下用乙醇：38％HCl＝1:2分别进行解离，解离时间都为15分钟；

5)染色：选取上述解离的根尖用不同染色剂1％结晶紫染色5分钟；

6)观察拍照：用普通光学显微镜进行观察，对观察到的染色进行拍照。