[发明专利]天冬氨酸酶变体及其制备方法与应用

权利要求书

1.天冬氨酸酶变体，其氨基酸序列与序列表中序列2相比，具有96％以上同一性，在序列2的第187位和第326位同时存在T187I和N326C的突变，并且与序列2所示的天冬氨酸酶相比具有改善的催化丙烯酸加氨活性；

所述天冬氨酸酶变体的氨基酸序列与序列表中序列2相比，还存在0-9处突变，所述突变选自：D20V、V75E、Q89H、L156F、T164I、Y204C、N226I、L258I、M285L、M321I、K324I、K381R、K389I、I406L、R426C和/或P456L。

2.天冬氨酸酶变体，，其特征在于：所述天冬氨酸酶变体的氨基酸序列与序列表中序列2相比，存在或仅存在如下1)-385)中任一所示突变组合：

1)V75E/Q89H/T187I/L258I/N326C/K381R/K389I；

2)D20V/Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/L258I/M285L/N326C/K381R/R426C；

3)Q89H/L156F/T164I/T187I/L258I/N326C/K389I/I406L/R426C；

4)L156F/T164I/T187I/L258I/K324I/N326C/K389I；

5)D20V/L156F/T164I/T187I/Y204C/N226I/M321I/K324I/N326C/K389I/R426C；

6)L156F/T187I/Y204C/K324I/N326C/K389I/I406L；

7)T187I/N226I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/K389I/I406L/P456L；

8)D20V/Q89H/L156F/T187I/M285L/N326C/K381R/K389I；

9)D20V/Q89H/T164I/T187I/Y204C/N226I/K324I/N326C；

10)L156F/T164I/T187I/L258I/N326C/I406L/R426C；

11)V75E/T187I/N226I/L258I/K324I/N326C/K381R/I406L；

12)V75E/T187I/L258I/M285L/N326C/I406L；

13)L156F/T187I/N226I/L258I/N326C/I406L；

14)D20V/L156F/T164I/T187I/N226I/M285L/M321I/K324I/N326C/I406L/R426C；

15)V75E/T187I/N226I/M321I/K324I/N326C/P456L；

16)V75E/Q89H/L156F/T187I/N326C/K381R/R426C；

17)T187I/N226I/M321I/N326C/K389I/I406L；

18)V75E/L156F/T187I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/P456L；

19)Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/N226I/M285L/K324I/N326C/K381R；

20)T187I/N226I/M321I/N326C/I406L/R426C；

21)V75E/L156F/T187I/N226I/L258I/M285L/N326C；

22)V75E/Q89H/L156F/T164I/T187I/N226I/N326C/K389I/I406L；

23)Q89H/T164I/T187I/Y204C/N226I/K324I/N326C/K381R/R426C；

24)D20V/Q89H/L156F/T187I/Y204C/M285L/K324I/N326C/K381R/K389I；

25)D20V/T164I/T187I/N226I/L258I/M285L/K324I/N326C；

26)V75E/Q89H/T187I/Y204C/L258I/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L/R426C；

27)V75E/Q89H/T164I/T187I/Y204C/N226I/M285L/M321I/N326C/K389I/R426C；

28)D20V/V75E/T187I/N226I/L258I/M285L/N326C/R426C；

29)D20V/Q89H/L156F/T187I/N226I/N326C/K381R/K389I；

30)D20V/V75E/L156F/T187I/N226I/M321I/K324I/N326C/R426C/P456L；

31)V75E/Q89H/T164I/T187I/M321I/N326C/K381R/K389I/R426C；

32)D20V/V75E/T164I/T187I/Y204C/M285L/M321I/N326C/K381R/R426C；

33)V75E/T164I/T187I/M321I/N326C/K381R/I406L；

34)V75E/L156F/T187I/Y204C/M321I/N326C/K389I/R426C；

35)T187I/M285L/N326C/I406L/R426C/P456L；

36)D20V/Q89H/T164I/T187I/M285L/N326C/K381R；

37)Q89H/T187I/Y204C/L258I/M321I/K324I/N326C/K381R/R426C；

38)V75E/Q89H/T187I/Y204C/L258I/M285L/M321I/N326C/I406L/R426C；

39)D20V/T187I/Y204C/L258I/N326C/K381R；

40)T187I/N226I/N326C/I406L/P456L；

41)D20V/L156F/T187I/L258I/M321I/K324I/N326C；

42)V75E/Q89H/L156F/T187I/M321I/N326C/R426C；

43)T187I/Y204C/N226I/M285L/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L/P456L；

44)Q89H/T187I/N226I/M285L/M321I/K324I/N326C/K389I；

45)V75E/L156F/T164I/T187I/Y204C/N226I/L258I/N326C/I406L；

46)V75E/Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/M285L/N326C/K381R/K389I/R426C；

47)D20V/V75E/L156F/T187I/N326C/K381R/R426C；

48)V75E/T187I/L258I/N326C/K381R；

49)D20V/V75E/T164I/T187I/M285L/M321I/N326C/K381R/R426C；

50)T187I/N226I/L258I/N326C/I406L；

51)V75E/T164I/T187I/M321I/N326C/I406L；

52)T187I/L258I/M285L/M321I/N326C；

53)D20V/Q89H/T187I/Y204C/L258I/M285L/N326C/K389I；

54)D20V/T187I/L258I/K324I/N326C/R426C；

55)T187I/Y204C/M285L/N326C/K381R；

56)T187I/Y204C/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/K389I/I406L；

57)Q89H/T187I/L258I/M285L/K324I/N326C/I406L；

58)D20V/V75E/T187I/N226I/L258I/K324I/N326C/K381R/K389I/P456L；

59)D20V/T164I/T187I/N226I/L258I/N326C/K389I；

60)T187I/Y204C/N326C/I406L/P456L；

61)D20V/T164I/T187I/L258I/M285L/K324I/N326C/I406L；

62)Q89H/T187I/M285L/N326C/K381R；

63)V75E/T187I/L258I/K324I/N326C/K389I/R426C/P456L；

64)D20V/Q89H/L156F/T187I/N226I/M321I/N326C/K381R/I406L；

65)V75E/T164I/T187I/N226I/M285L/K324I/N326C/K381R；

66)V75E/L156F/T164I/T187I/L258I/M285L/M321I/N326C/K381R/K389I/R426C；

67)V75E/T164I/T187I/L258I/M285L/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L/R426C；

68)D20V/V75E/Q89H/T187I/L258I/M285L/M321I/N326C/K389I；

69)T187I/N326C/K381R/K389I/P456L；

70)T164I/T187I/N226I/M285L/N326C/R426C；

71)D20V/V75E/Q89H/L156F/T187I/L258I/M285L/K324I/N326C；

72)D20V/V75E/Q89H/T164I/T187I/Y204C/L258I/M285L/K324I/N326C；

73)L156F/T164I/T187I/K324I/N326C/R426C；

74)D20V/V75E/L156F/T164I/T187I/L258I/M321I/K324I/N326C/K381R/I406L；

75)D20V/T187I/N226I/L258I/N326C/I406L；

76)V75E/Q89H/L156F/T187I/M321I/K324I/N326C；

77)L156F/T164I/T187I/K324I/N326C/K381R；

78)L156F/T164I/T187I/L258I/K324I/N326C；

79)D20V/V75E/Q89H/L156F/T187I/Y204C/L258I/M321I/N326C/K389I/I406L；

80)T187I/M285L/N326C/I406L/R426C；

81)T187I/N226I/N326C/K381R/P456L；

82)D20V/T164I/T187I/Y204C/M285L/K324I/N326C/K389I/R426C；

83)V75E/T187I/N326C/K381R/I406L；

84)T187I/Y204C/N326C/K381R/K389I；

85)T187I/N226I/L258I/M285L/M321I/N326C；

86)D20V/L156F/T187I/M285L/M321I/K324I/N326C/K389I；

87)D20V/L156F/T187I/Y204C/N326C/K389I/I406L/R426C；

88)T164I/T187I/K324I/N326C/K389I/R426C；

89)V75E/Q89H/T187I/M321I/K324I/N326C/I406L；

90)V75E/T187I/L258I/N326C/K389I；

91)D20V/V75E/L156F/T187I/N326C/K389I/I406L/R426C；

92)D20V/Q89H/T164I/T187I/N226I/N326C/K389I/I406L；

93)D20V/Q89H/L156F/T164I/T187I/L258I/M285L/N326C/K381R/R426C；

94)V75E/T164I/T187I/N226I/K324I/N326C/I406L；

95)D20V/T164I/T187I/L258I/M321I/N326C/K389I；

96)T187I/N226I/M285L/N326C/K381R/K389I；

97)T187I/N226I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/K389I/P456L；

98)V75E/Q89H/L156F/T187I/M321I/N326C/I406L；

99)D20V/Q89H/L156F/T164I/T187I/N226I/M321I/N326C/K389I/I406L/R426C；

100)V75E/T187I/Y204C/M285L/M321I/N326C/K381R/I406L/P456L；

101)Q89H/T164I/T187I/M285L/M321I/N326C/K381R/K389I；

102)T187I/N226I/L258I/M285L/M321I/N326C/K381R/I406L/R426C/P456L；

103)L156F/T187I/Y204C/M321I/K324I/N326C；

104)D20V/L156F/T164I/T187I/M321I/K324I/N326C；

105)T187I/Y204C/L258I/K324I/N326C；

106)T164I/T187I/N226I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/I406L/R426C；

107)D20V/T164I/T187I/Y204C/N226I/N326C/K389I/I406L；

108)L156F/T187I/Y204C/N226I/M285L/M321I/N326C/I406L/R426C/P456L；

109)V75E/Q89H/L156F/T187I/K324I/N326C/K389I/R426C/P456L；

110)L156F/T164I/T187I/K324I/N326C/K381R/I406L/R426C；

111)T164I/T187I/M321I/N326C/I406L；

112)D20V/Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/M285L/K324I/N326C/K381R/R426C；

113)L156F/T187I/Y204C/N326C/R426C；

114)D20V/T164I/T187I/N226I/L258I/N326C/R426C；

115)T187I/Y204C/N226I/L258I/M285L/M321I/N326C/K389I/I406L/R426C；

116)D20V/T187I/N226I/N326C/K389I；

117)V75E/Q89H/L156F/T187I/L258I/M321I/N326C/I406L/R426C；

118)T187I/Y204C/N226I/M285L/N326C/R426C；

119)T187I/Y204C/M285L/N326C/K381R/R426C；

120)L156F/T187I/N226I/N326C/K381R；

121)D20V/Q89H/T187I/Y204C/M285L/N326C/R426C；

122)L156F/T187I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/I406L/R426C；

123)T187I/Y204C/L258I/M285L/K324I/N326C；

124)D20V/T187I/Y204C/N226I/L258I/N326C/I406L/R426C；

125)D20V/L156F/T187I/N226I/M285L/N326C/K381R；

126)D20V/Q89H/L156F/T187I/M285L/K324I/N326C/K389I；

127)V75E/T187I/K324I/N326C/K389I；

128)Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/N226I/L258I/M285L/N326C/K389I/R426C；

129)Q89H/T187I/N226I/L258I/M321I/N326C/K381R/K389I/P456L；

130)D20V/V75E/Q89H/T187I/Y204C/M321I/K324I/N326C/K381R；

131)Q89H/T164I/T187I/M285L/N326C；

132)T187I/L258I/N326C/K381R/R426C；

133)L156F/T164I/T187I/N326C/K389I；

134)L156F/T164I/T187I/N226I/N326C/R426C；

135)D20V/Q89H/T187I/Y204C/M285L/M321I/N326C/K381R/R426C；

136)V75E/Q89H/T187I/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L/P456L；

137)D20V/T164I/T187I/M321I/N326C/K389I/P456L；

138)Q89H/T187I/L258I/N326C/P456L；

139)V75E/L156F/T164I/T187I/L258I/M285L/N326C/K381R/K389I/R426C；

140)T187I/N226I/M285L/K324I/N326C；

141)T187I/L258I/N326C/K381R/K389I/I406L；

142)D20V/T187I/L258I/K324I/N326C/I406L；

143)V75E/L156F/T164I/T187I/Y204C/L258I/N326C/K389I/I406L；

144)D20V/Q89H/L156F/T187I/K324I/N326C/K381R/R426C；

145)Q89H/T187I/N226I/M285L/M321I/K324I/N326C；

146)T164I/T187I/M285L/M321I/N326C/K381R；

147)Q89H/L156F/T187I/Y204C/N226I/M285L/M321I/N326C/K389I/R426C；

148)Q89H/L156F/T164I/T187I/L258I/N326C/K389I；

149)T164I/T187I/N226I/M321I/K324I/N326C/K381R；

150)D20V/Q89H/T164I/T187I/Y204C/N226I/M285L/N326C/K381R/K389I/I406L；

151)V75E/T164I/T187I/L258I/N326C/K389I；

152)T187I/N326C/K389I/I406L/R426C/P456L；

153)V75E/T187I/N326C/K381R/K389I/I406L/R426C；

154)T187I/L258I/M321I/N326C/I406L；

155)Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/N226I/K324I/N326C/P456L；

156)T187I/N226I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/I406L/R426C/P456L；

157)D20V/T187I/M285L/N326C/K381R；

158)V75E/T187I/Y204C/M321I/N326C；

159)T164I/T187I/Y204C/L258I/K324I/N326C/K389I；

160)V75E/L156F/T164I/T187I/Y204C/L258I/M285L/M321I/N326C/K389I/I406L；

161)V75E/T164I/T187I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/I406L/R426C；

162)D20V/T187I/M285L/N326C/K389I/I406L/R426C；

163)T187I/M285L/M321I/N326C/R426C；

164)Q89H/L156F/T164I/T187I/N226I/L258I/M321I/K324I/N326C；

165)Q89H/T164I/T187I/Y204C/L258I/N326C；

166)T187I/M285L/M321I/N326C/I406L/R426C；

167)D20V/L156F/T187I/M285L/M321I/K324I/N326C/R426C；

168)D20V/T187I/M285L/M321I/K324I/N326C/K389I；

169)T187I/M285L/N326C/K381R/I406L/R426C；

170)V75E/Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/N226I/M285L/K324I/N326C；

171)V75E/L156F/T164I/T187I/Y204C/M285L/N326C；

172)D20V/T187I/M285L/M321I/K324I/N326C/R426C；

173)T187I/Y204C/K324I/N326C/I406L/R426C；

174)V75E/Q89H/L156F/T187I/Y204C/N326C；

175)Q89H/T164I/T187I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/K389I/I406L/P456L；

176)T164I/T187I/L258I/M285L/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L/P456L；

177)T187I/L258I/N326C/I406L/R426C；

178)V75E/T164I/T187I/L258I/N326C/K381R/R426C；

179)D20V/T187I/N226I/M285L/N326C/R426C；

180)V75E/Q89H/T164I/T187I/Y204C/L258I/N326C/I406L；

181)L156F/T187I/M321I/N326C/I406L；

182)V75E/Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/L258I/M285L/M321I/N326C/K389I；

183)V75E/T164I/T187I/N226I/L258I/M285L/K324I/N326C/K389I；

184)V75E/T187I/M285L/K324I/N326C/R426C；

185)D20V/Q89H/T164I/T187I/N226I/L258I/M321I/K324I/N326C/K381R/P456L；

186)V75E/Q89H/T164I/T187I/Y204C/L258I/M321I/N326C；

187)Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/N226I/L258I/M285L/N326C/K389I；

188)Q89H/L156F/T187I/Y204C/N226I/M321I/K324I/N326C/K381R/I406L；

189)L156F/T187I/M285L/N326C/R426C；

190)T187I/N226I/M285L/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L/R426C/P456L；

191)Q89H/T187I/N326C/R426C/P456L；

192)Q89H/T187I/Y204C/K324I/N326C/K389I/I406L/R426C；

193)D20V/Q89H/T164I/T187I/N226I/M285L/M321I/N326C/K381R/P456L；

194)V75E/L156F/T187I/Y204C/L258I/M321I/K324I/N326C/K381R/I406L/R426C；

195)D20V/T187I/N226I/N326C/K381R；

196)D20V/L156F/T187I/M285L/K324I/N326C/K381R/K389I；

197)Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/M285L/K324I/N326C/K381R；

198)V75E/L156F/T187I/N326C/K389I/R426C；

199)T187I/Y204C/N226I/N326C/K381R；

200)T187I/Y204C/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/I406L/R426C；

201)T187I/L258I/K324I/N326C/K389I/I406L；

202)T187I/M321I/K324I/N326C/K381R；

203)V75E/Q89H/T164I/T187I/Y204C/N326C/K389I；

204)V75E/Q89H/T187I/N226I/N326C/K389I；

205)T187I/Y204C/M285L/N326C/P456L；

206)L156F/T187I/Y204C/K324I/N326C/K381R/R426C；

207)Q89H/T164I/T187I/M321I/N326C/I406L；

208)T164I/T187I/L156F/K324I/N326C；

209)D20V/V75E/T187I/N226I/M321I/K324I/N326C；

210)T187I/K324I/N326C/I406L/R426C/P456L；

211)T164I/T187I/K324I/N326C/R426C；

212)T164I/T187I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/K389I/P456L；

213)Q89H/T164I/T187I/Y204C/N226I/L258I/M321I/N326C/R426C；

214)Q89H/T187I/N226I/M321I/N326C；

215)Q89H/L156F/T187I/Y204C/N326C/K381R/I406L/R426C/P456L；

216)D20V/T187I/M321I/K324I/N326C/K381R/I406L/R426C；

217)T187I/N226I/L258I/N326C/I406L/P456L；

218)L156F/T187I/L258I/M321I/N326C；

219)T164I/T187I/Y204C/N226I/L258I/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L/P456L；

220)D20V/L156F/T187I/N226I/N326C；

221)V75E/Q89H/L156F/T187I/N226I/M321I/K324I/N326C/R426C；

222)D20V/T187I/Y204C/N226I/K324I/N326C/K381R/R426C；

223)Q89H/T164I/T187I/Y204C/L258I/M321I/K324I/N326C/K389I/I406L/R426C；

224)D20V/L156F/T187I/M285L/N326C；

225)V75E/T187I/Y204C/N226I/K324I/N326C/K381R/I406L；

226)V75E/T187I/M321I/I406L/N326C/R426C；

227)Q89H/T187I/L258I/N326C/R426C；

228)V75E/Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/M285L/M321I/N326C/K389I；

229)L156F/T187I/Y204C/N226I/M285L/K324I/N326C/K389I/R426C/P456L；

230)T187I/N226I/M285L/N326C/R426C；

231)V75E/Q89H/T164I/T187I/L258I/M285L/M321I/N326C/K389I/R426C；

232)D20V/T187I/L258I/M321I/N326C/R426C；

233)D20V/L156F/T187I/Y204C/N226I/L258I/K324I/N326C/K381R/R426C；

234)D20V/L156F/T187I/Y204C/K324I/N326C；

235)V75E/Q89H/T187I/N326C/K389I/R426C；

236)T164I/T187I/Y204C/L258I/M321I/K324I/N326C/K389I；

237)D20V/T164I/T187I/M285L/N326C；

238)T164I/T187I/Y204C/N226I/K324I/N326C/K389I/I406L；

239)T187I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/I406L；

240)T187I/Y204C/N226I/L258I/M321I/N326C/I406L；

241)V75E/T187I/N226I/N326C/K381R；

242)V75E/T187I/Y204C/N326C/I406L；

243)V75E/T187I/Y204C/N226I/M285L/K324I/N326C/K381R/R426C；

244)Q89H/T187I/M285L/N326C/R426C；

245)Q89H/T187I/K324I/N326C/K389I；

246)Q89H/T164I/T187I/K324I/N326C/K389I；

247)L156F/T187I/Y204C/L258I/M285L/M321I/N326C/K381R/K389I；

248)T187I/K324I/N326C/K381R/K389I/I406L；

249)V75E/Q89H/T164I/T187I/Y204C/M285L/N326C/K389I/R426C；

250)V75E/T187I/Y204C/N226I/L258I/N326C/I406L；

251)T187I/Y204C/N226I/K324I/N326C/R426C；

252)V75E/Q89H/L156F/T164I/T187I/M285L/N326C/K381R/K389I/R426C；

253)D20V/L156F/T187I/M321I/N326C/I406L/R426C；

254)D20V/T187I/Y204C/N226I/M285L/K324I/N326C/R426C；

255)T164I/T187I/N226I/L258I/M285L/M321I/N326C/K381R/R426C；

256)V75E/Q89H/L156F/T187I/N226I/M285L/N326C/K381R/K389I；

257)D20V/T187I/N226I/M285L/K324I/N326C/K381R/R426C；

258)T187I/Y204C/M321I/N326C/K381R；

259)V75E/T164I/T187I/N226I/L258I/N326C/K389I；

260)D20V/L156F/T164I/T187I/L258I/N326C/K381R/K389I/I406L/R426C；

261)D20V/V75E/Q89H/L156F/T164I/T187I/L258I/N326C/K381R/K389I/I406L；

262)T187I/N226I/N326C/K381R/I406L/R426C；

263)Q89H/T187I/Y204C/N326C/I406L；

264)D20V/T164I/T187I/L258I/K324I/N326C/K381R/I406L；

265)V75E/T164I/T187I/M321I/K324I/N326C/K389I/R426C/P456L；

266)Q89H/T187I/Y204C/N226I/N326C/K389I；

267)L156F/T187I/M321I/N326C/K389I/R426C；

268)Q89H/L156F/T187I/N226I/L258I/M285L/N326C/K389I/I406L/R426C；

269)Q89H/L156F/T187I/Y204C/M285L/M321I/N326C/R426C/P456L；

270)Q89H/L156F/T187I/N226I/K324I/N326C/K389I/I406L/R426C；

271)T164I/T187I/N226I/N326C/K381R；

272)V75E/Q89H/T187I/Y204C/N226I/L258I/K324I/N326C/K381R；

273)Q89H/T164I/T187I/Y204C/M321I/K324I/N326C/K381R/I406L/R426C；

274)D20V/V75E/Q89H/T164I/T187I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R；

275)D20V/T187I/N326C/K381R/R426C；

276)T187I/K324I/N326C/K389I/R426C；

277)Q89H/T187I/L258I/M285L/N326C/K389I/I406L；

278)D20V/T187I/M321I/N326C/I406L；

279)V75E/Q89H/T187I/L258I/M321I/N326C/I406L/R426C；

280)T187I/N226I/L258I/M321I/N326C/R426C；

281)T164I/T187I/Y204C/N226I/L258I/M321I/K324I/N326C/K381R/R426C；

282)L156F/T164I/T187I/Y204C/N326C/K381R/R426C；

283)T187I/N226I/M285L/K324I/N326C/R426C；

284)D20V/T187I/Y204C/N226I/M321I/N326C/I406L/R426C；

285)Q89H/L156F/T187I/Y204C/N226I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C；

286)V75E/L156F/T164I/T187I/L258I/N326C；

287)D20V/V75E/T164I/T187I/Y204C/N326C；

288)D20V/T187I/Y204C/K324I/N326C；

289)L156F/T187I/Y204C/N326C/K381R/R426C；

290)V75E/Q89H/T164I/T187I/N326C；

291)D20V/T164I/T187I/N226I/K324I/N326C；

292)T187I/N226I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C；

293)T187I/N226I/L258I/N326C/P456L；

294)T164I/T187I/N226I/K324I/N326C/K389I/P456L；

295)D20V/T187I/Y204C/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/K389I/R426C；

296)V75E/L156F/T187I/Y204C/L258I/M321I/N326C/K381R/I406L/R426C；

297)T187I/Y204C/N226I/L258I/M321I/K324I/N326C/K381R/K389I/P456L；

298)T187I/N226I/M321I/K324I/N326C；

299)V75E/T164I/T187I/N226I/L258I/M285L/N326C/K389I/I406L；

300)V75E/T187I/M285L/M321I/K324I/N326C/R426C；

301)V75E/T187I/L258I/M285L/N326C/K389I；

302)T164I/T187I/M285L/N326C/K381R/R426C；

303)T164I/T187I/N326C/K381R/I406L；

304)T164I/T187I/M285L/N326C/K389I；

305)D20V/L156F/T164I/T187I/L258I/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L/R426C；

306)D20V/L156F/T187I/M321I/K324I/N326C/K389I/R426C/P456L；

307)T187I/N226I/L258I/N326C/K381R/R426C；

308)T187I/N226I/M285L/N326C/K389I/R426C/P456L；

309)D20V/T164I/T187I/M321I/N326C/K381R/R426C；

310)T187I/M321I/N326C/K381R/K389I/R426C；

311)T164I/T187I/Y204C/N226I/L258I/M285L/K324I/N326C/K389I；

312)Q89H/T187I/Y204C/N226I/N326C/K389I/I406L/R426C；

313)V75E/L156F/T187I/N226I/K324I/N326C/I406L/R426C；

314)Q89H/L156F/T187I/Y204C/M285L/M321I/N326C/K389I/I406L；

315)Q89H/T187I/Y204C/N326C/P456L；

316)D20V/Q89H/L156F/T187I/L258I/M321I/N326C/K381R/P456L；

317)L156F/T187I/Y204C/M321I/N326C/K389I/R426C；

318)D20V/V75E/L156F/T187I/Y204C/M285L/N326C/K381R/K389I；

319)D20V/T187I/L258I/I406L/N326C/R426C；

320)D20V/V75E/L156F/T187I/M321I/K324I/N326C/R426C/P456L；

321)T164I/T187I/N226I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/K381R/K389I/P456L；

322)V75E/L156F/T187I/M285L/M321I/N326C/I406L/R426C；

323)T164I/T187I/Y204C/N226I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C/I406L；

324)T187I/N326C/K381R/K389I/I406L/R426C；

325)T164I/T187I/N226I/N326C/R426C；

326)V75E/T164I/T187I/N226I/M321I/N326C/K389I；

327)T187I/Y204C/N326C/R426C/P456L；

328)V75E/Q89H/T187I/Y204C/K324I/N326C/I406L；

329)D20V/T187I/N226I/L258I/N326C/K389I/I406L；

330)D20V/T164I/T187I/M285L/M321I/K324I/N326C/I406L；

331)D20V/T187I/L258I/M321I/N326C/K381R/K389I/R426C；

332)V75E/L156F/T187I/L258I/K324I/N326C；

333)V75E/T164I/T187I/Y204C/L258I/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L；

334)D20V/V75E/Q89H/T164I/T187I/N226I/M285L/M321I/N326C/K389I/I406L；

335)V75E/Q89H/L156F/T164I/T187I/N226I/M321I/N326C/I406L；

336)D20V/T187I/N226I/L258I/N326C/I406L/R426C；

337)L156F/T187I/Y204C/K389I/N326C/R426C；

338)T187I/Y204C/L258I/M321I/N326C/R426C；

339)D20V/T187I/N326C/K389I/R426C；

340)T187I/L258I/M285L/N326C/R426C；

341)D20V/T164I/T187I/M285L/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L；

342)Q89H/L156F/T164I/T187I/Y204C/M285L/M321I/N326C/K389I/I406L；

343)T187I/L258I/M285L/M321I/N326C/K381R；

344)T187I/L258I/N326C/K381R/I406L/R426C；

345)D20V/T164I/T187I/M321I/N326C；

346)Q89H/L156F/T164I/T187I/M285L/N326C/K389I/I406L/R426C；

347)V75E/L156F/T164I/T187I/M321I/N326C；

348)D20V/T187I/Y204C/N226I/N326C/K381R/I406L/R426C；

349)D20V/Q89H/L156F/T187I/Y204C/N226I/M285L/K324I/N326C/K381R/K389I；

350)D20V/V75E/Q89H/L156F/T187I/Y204C/M285L/M321I/N326C/K389I；

351)D20V/T164I/T187I/N226I/L258I/N326C/K381R/K389I；

352)L156F/T164I/T187I/Y204C/N226I/L258I/M321I/K324I/N326C；

353)V75E/Q89H/T164I/T187I/N326C/K381R/K389I；

354)L156F/T187I/N226I/L258I/M285L/M321I/N326C/K381R/K389I/I406L；

355)Q89H/T164I/T187I/Y204C/L258I/N326C/K381R；

356)D20V/Q89H/T187I/L258I/N326C；

357)V75E/L156F/T187I/M285L/N326C/K389I；

358)Q89H/L156F/T187I/Y204C/N226I/L258I/N326C/K389I/I406L/R426C；

359)D20V/V75E/L156F/T164I/T187I/Y204C/M285L/N326C/K381R/K389I；

360)V75E/Q89H/L156F/T164I/T187I/N226I/N326C/I406L；

361)T187I/M285L/N326C/K381R/K389I/P456L；

362)V75E/Q89H/T164I/T187I/M321I/K324I/N326C/K381R/I406L；

363)Q89H/L156F/T187I/L258I/M321I/K324I/N326C；

364)T187I/L258I/M285L/N326C/K389I；

365)T187I/Y204C/N226I/L258I/N326C/R426C；

366)V75E/Q89H/T164I/T187I/Y204C/M285L/N326C/R426C；

367)T187I/Y204C/N226I/L258I/N326C；

368)D20V/L156F/T164I/T187I/N226I/L258I/M285L/N326C/I406L/R426C；

369)T187I/Y204C/L258I/N326C/K381R；

370)D20V/T187I/N326C/K381R/I406L；

371)D20V/V75E/T187I/N226I/K324I/N326C/K381R/K389I/P456L；

372)D20V/Q89H/T187I/L258I/M321I/K324I/N326C/K389I；

373)T164I/T187I/Y204C/M285L/N326C/R426C；

374)L156F/T187I/Y204C/N326C/K381R；

375)T187I/L258I/N326C/K389I/I406L/R426C；

376)L156F/T187I/M285L/N326C/K389I；

377)D20V/T164I/T187I/L258I/K324I/N326C；

378)V75E/L156F/T164I/T187I/Y204C/N226I/L258I/M285L/M321I/K324I/N326C；

379)V75E/T187I/M285L/K324I/N326C/K381R/R426C；

380)V75E/T187I/N226I/M285L/N326C；

381)Q89H/L156F/T187I/N326C/K381R；

382)D20V/T187I/K324I/N326C/I406L；

383)D20V/T187I/M321I/N326C/K389I；

384)V75E/L156F/T187I/N326C/R426C；

385)T187I/Y204C/N326C/I406L/R426C。