[发明专利]L-泛解酸内酯脱氢酶及其突变体、共表达工程菌及应用

权利要求书

1.一种L-泛解酸内酯脱氢酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种L-泛解酸内酯脱氢酶突变体，由SEQ ID NO:1所示氨基酸经单点突变或者定点半饱和突变获得，突变的位点为254位，第241位，第272位或第308位。

3.如权利要求2所述的L-泛解酸内酯脱氢酶突变体，其特征在于所述突变体为下列之一：(1)SEQ ID NO:1所示氨基酸第254位亮氨酸突变为异亮氨酸；(2)SEQ ID NO:1所示氨基酸第241位缬氨酸突变为异亮氨酸；(3)SEQ ID NO:1所示氨基酸第254位亮氨酸突变为异亮氨酸，且第272位丝氨酸突变为天冬氨酸；(4)SEQ ID NO:1所示氨基酸第254位亮氨酸突变为异亮氨酸，且第308位缬氨酸变为亮氨酸。

4.编码权利要求1～3之一所述L-泛解酸内酯脱氢酶或其突变体的基因。

5.含有权利要求4所述编码基因的表达载体。

6.权利要求2或3所述L-泛解酸内酯脱氢酶与分子伴侣pGro7构建的共表达工程菌。

7.如权利要求6所述的共表达工程菌，其特征在于所述共表达工程菌按如下方法获得：将L-泛解酸内酯脱氢酶编码基因的重组质粒导入分子伴侣菌E.coli BL21(DE3)-pGro7制备的感受态细胞中，在卡那霉素和氯霉素的双抗性固体培养基中筛选获得所述共表达工程菌。

8.权利要求6所述共表达工程菌在微生物催化制备D-泛解酸内酯中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于所述的应用为：L-泛解酸内酯脱氢酶、共轭聚酮还原酶和葡萄糖脱氢酶三酶偶联催化L-泛解酸内酯构型反转制备D-泛解酸内酯。