[发明专利]一种家猪家系划分及亲子鉴定试剂盒及方法

权利要求书

1.一种安庆六白猪家系划分及亲子鉴定试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括用于扩增14个SSR位点的引物，所述14个SSR位点分别为位于第1条染色体的S0155微卫星座、位于第2条染色体的SW240微卫星座、位于第3条染色体的SW72微卫星座、位于第4条染色体的S0227微卫星座；位于第5条染色体的SW963微卫星座；位于第6条染色体的SW122微卫星座；位于第7条染色体的S0101微卫星座；位于第8条染色体的S0225微卫星座；位于第11条染色体的S0386微卫星座；位于第12条染色体的S0090微卫星座；位于第15条染色体的S0355微卫星座；位于第16条染色体上的S0026微卫星座；位于第17条染色体上的SW24微卫星座；位于性染色体上的SW2156微卫星座；

所述14个SSR位点PCR扩增所需的引物如下所述：S0155微卫星座正向引物序列如SEQID NO. 1所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 2所示；SW240微卫星座正向引物序列如SEQ IDNO. 3所示，反向引物序列如SEQ ID NO.4所示；SW72微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO.5所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 6所示；S0227微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO. 7所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 8所示；SW963微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO. 9所示，反向引物序列如SEQ ID NO.10所示；SW122微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO.11所示，反向引物序列如SEQ ID NO.12所示；S0101微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO. 13所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 14所示；S0225微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO. 15所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 16所示；S0386微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO. 17所示，反向引物序列SEQ ID NO. 18所示；S0090微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO. 19所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 20所示；S0355微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO. 21所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 22所示；S0026微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO. 23所示，反向引物序列如SEQ ID NO.24所示；SW24微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO. 25，反向引物序列如SEQ ID NO. 26所示；SW2156微卫星座正向引物序列如SEQ ID NO. 27所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 28所示。

2.权利要求1所述的鉴定试剂盒，其特征在于：位点S0155、SW963、S0386荧光标记为5`-FAM，位点SW240、SW72、SW122、SW24、S0026荧光标记为5`-HEX，位点S0227、S0101、S0090、S0355荧光标记为5`TAMRA；位点S0155、SW240、SW72、S0227、SW963、S0101、S0225、S0386、S0090、S0355、SW24的PCR退火温度为55℃，位点SW122的PCR退火温度为58.5℃，位点SW2156退火温度为60℃。

3.权利要求2所述的鉴定试剂盒，其特征在于：所述试剂盒为25μL反应体系，包括1μL上游引物，1μL下游引物，1μL mix dNTR，2.5μL 包括MgCl₂Taq Buffer，0.5μL Taq酶，19 μLddH₂O。

4.一种安庆六白猪家系划分及亲子鉴定方法，其特征在于：以权利要求3所述试剂盒中SSR引物序列进行PCR从而进行家系划分及亲子鉴定。

5.权利要求4所述的家系划分及亲子鉴定方法，其特征在于，具体步骤如下所述：（1）样品采集；（2）DNA提取：采用北京艾德莱生物科技公司组织基因组DNA快速提取试剂盒进行猪DNA提取；（3）SSR引物序列合成；（4）PCR扩增；（5）PCR产物毛细管电泳检测；（6）数据处理及结果分析。