[发明专利]一种产酸菌JC-C及其应用与产酸菌JC-C的培养、鉴定方法

说明书

本发明公开了一种产酸菌JC‑C，该菌株命名为：黄青霉(Penicillium chrysogenum)JC‑C，已于2021年01月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO：21423。可在产酸中进行应用，且于温度为30℃、pH为4、转速为160rpm条件下利用发酵培养基进行恒温震荡培养产酸效率最高。本发明的产酸菌，能够为生物产酸提供菌种资源。

技术领域

本发明属于环境微生物技术领域，涉及一种产酸菌JC-C及其应用，还涉及该产酸菌JC-C的培养、鉴定方法。

背景技术

采矿业一般作为矿区当地的重要经济支柱，为当地经济建设与社会发展提供有力的支持；同时随着矿产资源的开发、运输及冶炼加工，带来的土壤污染问题日益严重，其中重金属土壤污染危害最大、治理困难而日渐受到人的关注。重金属通常以稳定状态存在于环境之中，但是由于采矿生产，原本存在于深层土壤、矿山中的重金属被输送至地表,并随着水循环水扩散到整个生态环境中，已经严重威胁到当地居民的生命健康。

目前矿区土壤污染修复技术主要是物理修复技术、化学修复技术。随着科学技术的日益发展近几年对矿区土壤的微生物修复技术也成为了一项重要手段，其主要原理即在重金属污染区筛选提取具有高重金属抗性的微生物并加以培养，利用其生命代谢活动及代谢分泌产生的有机酸对土壤中重金属进行螯合、溶解等方式减少土壤中重金属毒性。这种新兴的修复方法相较于传统修复方法具有运行成本低，效果显著，对环境友好等特点，日渐被国内外重视及运用。

发明内容

本发明的目的是提供一种产酸菌JC-C及其应用与产酸菌JC-C的培养、鉴定方法，为生物产酸并改良尾矿随意处理导致周边区域重金属污染土壤问题提供了菌种资源。

本发明所采用的技术方案是，一种产酸菌JC-C，该菌株命名为：产黄青霉(Penicillium chrysogenum)，已于2021年01月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO：21423。

产酸菌JC-C的培养方法，具体为：

步骤1、菌株的分离培养

采集受重金属污染严重的土壤作为样品；

制备查式培养基：将蔗糖30g、NaNO₃3.0g、K₂HPO₄1.0g、KCl 0.5g，FeSO₄·7H₂O0.01g、琼脂20.0g、蒸馏水1L，混合后，于121℃高温灭菌20min，接着倒平板待其凝固，制成无菌的查式培养基，用来进行分离培养；

将采集的土壤样品与无菌水混合制备土壤悬液，土壤悬液经梯度稀释后涂布于培养基表面，并编号，于30℃恒温培养箱中培养3-5d；

步骤2、鉴别产酸菌株

制备产酸鉴别培养基：将1.6％溴甲酚紫加入查式固体培养基中，在121℃高温灭菌20min，倒平板待其凝固后制成无菌的产酸鉴别培养基备用，其颜色为紫色；

将步骤1培养后的菌株取出，观察菌株形态，挑选出不同形态菌落培养于产酸鉴别培养基；

培养3-5d后培养基由紫色变为黄色则说明该菌株具有产酸能力，若无变化则说明该菌株不具有产酸能力，挑选具有产酸能力的菌株多次接种于产酸鉴别培养基中，获取纯化后的单一菌株；

当添加重金属的查式培养基中，添加Zn²⁺浓度高于400mg/L，或Pb²⁺浓度高于2000mg/L，或Cd²⁺浓度高于200mg/L时，才会对产酸菌JC-C产生严重抑制作用。