[发明专利]一种内生真菌及其在防治腐烂病中的应用

说明书

本发明公开了一种内生真菌及其在防治腐烂病中的应用。本发明从梨树枝干中分离内生真菌，橘青霉(Penicillium citrinum)，其菌株号为ZZ1。其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.22436。其18S rDNA的核苷酸序列含有序列表中序列1所示的DNA分子。实验证明，菌株ZZ1对梨树腐烂病菌和苹果树腐烂病菌生长均具有很好抑制效果，抑制率均达到90％以上。菌株ZZ1过滤液也可以显著抑制苹果树腐烂病菌和梨树腐烂病菌生长、以及梨树果实和枝条腐烂病的发病程度，其作为生防真菌资源，具有很好的应用前景，可对植物腐烂病害进行安全、有效和环保的生物防治。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种内生真菌及其在防治腐烂病的方法中的应用。

背景技术

腐烂病又称烂皮病、臭皮病等，是一种真菌病害，可以危害苹果、梨等重要果树，当前在世界各地均有发生。发病植株树皮皮层腐烂，发病严重时引起树主干皮层坏死，甚至整株枯死。当前，化学防治仍是防治果树腐烂病菌危害最有效的手段之一。但大量的使用农药，不仅增加环境对病原菌的选择压力，还会造成严重的环境污染，严重破坏生态环境。随着人们生活水平的不断提高，人们对环境及水果的质量要求越来越高。因此，寻找防治病害的低残留、无污染、易降解的生物农药一直是研究热点。

植物内生真菌是指其生活史的某一阶段或整个阶段生活在健康的植物组织或细胞内，不会引起宿主植物产生明显病害症状的一类真菌。已有研究表明，植物内生真菌可作为潜在的生防因子，通过与病原菌争夺营养物质和空间来抑制病原菌的生长，或通过产生抗生素类、水解酶类或次级代谢产物等物质抑制病原菌的正常生长，最终导致其死亡。植物内生真菌也可能通过自身的活性物质促进寄主植物生长，进而增强其抗病的能力。因此，内生菌以其独特的优势，已成为植物病害生物防治的潜在资源菌。目前，已有内生真菌用于作物病害防治的报道，如哈茨木霉防治玉米锈病、小斑病和大斑病等病害。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何防治腐烂病或如何对植物腐烂病进行生物防治。

为了解决上述技术问题，本发明首先提供了一种橘青霉。所述橘青霉为橘青霉(Penicillium citrinum)，其菌株号为ZZ1，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.22436。

所述橘青霉的18S rDNA的核苷酸序列含有序列表中序列1所示的DNA分子。所述橘青霉的微管蛋白的编码序列含有序列表中序列2所示的DNA分子。

为了解决上述技术问题，本发明还提供了上文所述的橘青霉的培养物。所述培养物是将上文所述的橘青霉在微生物培养基中培养得到的物质(即发酵产物，如含有橘青霉菌株ZZ1和分泌到液体培养基内的物质即发酵液，或如含有橘青霉菌株ZZ1和分泌到固体培养基内的物质即固体发酵物)。

为解决上述技术问题，本发明还提供了菌剂。

本发明所提供的菌剂的活性成分可为上文所述橘青霉和/或上文所述橘青霉的代谢物和/或上文所述的培养物。

上文中，所述橘青霉菌株ZZ1的代谢物可为橘青霉菌株ZZ1的发酵液。橘青霉菌株ZZ1的发酵液可按照如下方法制备：在液体发酵培养基中培养橘青霉菌株ZZ1，收集发酵液(含有橘青霉菌株ZZ1和分泌到液体培养基内的物质)，该发酵液即为橘青霉菌株ZZ1的代谢物。

上述菌剂中，所述菌剂还可包括载体。所述载体可为固体载体或液体载体。

上述菌剂中，所述菌剂的剂型可为多种剂型，包括但不限于液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂等。

上文所述菌剂可具有下述至少一种特性：

A1)抑制植物腐烂病菌；

A2)抑制植物腐烂病；

A3)防治植物腐烂病。