[发明专利]一种毛囊干细胞的分离培养方法

权利要求书

1.一种毛囊干细胞的分离方法，其特征在于，包括：

S1、进行毛囊的显微剥离得到毛囊；

S2、在完全培养基中培养毛囊，经过纯化后得到毛囊干细胞；所述完全培养基包括基础培养基、表皮生长因子、胰岛素、氢化可的松、L-谷酰胺、维生素A、维生素D2、转铁蛋白、亚油酸、牛血清白蛋白和胎牛血清。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S1包括：取毛囊处皮肤，消毒后在体视镜下用镊子夹住毛囊靠近表皮的峡部，向真皮方向用力撕出毛囊；用针头固定住毛囊，用解剖刀小心划破真皮鞘，并将毛囊剥离出来，切断真皮乳头和真皮鞘间的连接。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述完全培养基包括基础培养基、5-20ng/mL的表皮生长因子、2-10μg/mL的胰岛素、0.5-4μg/mL的氢化可的松、2-9mmol/L的L-谷酰胺、0.005-0.3μg/mL的维生素A、0.5-3μg/mL的维生素D2、0.5-3μg/mL转铁蛋白、50-200ng/mL的亚油酸、10-40μg/mL的牛血清白蛋白和10-25％的胎牛血清。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将S1中得到的毛囊转入培养容器中，加入完全培养基培养3-7天。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述纯化步骤包括：

在室温的条件下，用消化液消化至成纤维细胞脱落，将成纤维细胞消化下来收集备用，再向培养板中加消化液，转到37℃培养箱继续消化3-5分钟，用缓冲液收集消化下来的毛囊干细胞。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在S2之后还包括步骤S3：将得到的毛囊干细胞进行传代；

优选的，在S3中，将毛囊干细胞和成纤维细胞共培养，加入完全培养基后进行培养，每2-3天更换培养液，待毛囊干细胞汇合度达到80-90％进行传代。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述毛囊干细胞为人毛囊干细胞。

8.根据权利要求1-6任一项所述方法得到的毛囊干细胞。

9.一种用于皮肤修复的产品，其特征在于，所述产品包括权利要求8所述的毛囊干细胞。

10.权利要求8所述的毛囊干细胞在医学领域中的应用；优选的，所述毛囊干细胞在皮肤修复领域中的应用。