[发明专利]一种用于快速检测细胞制品中真菌的培养基及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种用于快速检测细胞制品中真菌的培养基及其制备方法和应用，所述培养基包括马铃薯汤、葡萄糖、蛋白胨、酵母浸粉、磷酸二氢钾、硫酸镁和血清。马铃薯汤、蛋白胨、酵母浸粉用于提供真菌生长的碳源、氮源和部分生长因子；葡萄糖提供真菌发酵或生长的碳源，利于真菌生长；磷酸二氢钾作为缓冲剂；硫酸镁用于维持渗透压，同时镁离子在糖和蛋白质的代谢中有极其重要的作用；血清含有血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，尤其是丰富的生长因子和低分子营养物质能促进微生物的生长，从而提高细胞制品的微生物检测的灵敏度，提高真菌检测的准确性。

技术领域

本发明涉及微生物检测技术领域，具体涉及一种用于快速检测细胞制品中真菌的培养基及其制备方法和应用。

背景技术

细胞培养是生物实验的开始，也是生物技术的基础，因此，在进行生物实验时要保证培养的细胞是无菌的、清洁的。培养的细胞如果受到微生物的污染，会在污染的后期才能发现。如果是真菌感染，在感染后期，能在低倍镜下可以看到小黑点；细胞受到污染，其生长会发生异常，高倍镜下可以分辨，这时也是培养的后期了。但是真菌的生长周期较细菌慢，通常在一周甚至更长的时间才发现真菌感染，此时通常进行实验的后期，导致浪费大量的资料和时间。

而当前还没有一种针对细胞制品的快速、高灵敏地检查细胞是否受到真菌污染的产品，特别是干细胞制品。综上所述，研发一种能快速、高灵敏检查细胞培养过程是否受到污染的产品是本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容

针对现有技术中存在的上述技术问题，本发明提供一种用于快速检测细胞制品中真菌的培养基及其制备方法和应用，通过所述培养基快速、高灵敏地检查细胞制品真菌污染的情况。

本发明公开了一种用于快速检测细胞制品中真菌的培养基，包括马铃薯汤、葡萄糖、蛋白胨、酵母浸粉、磷酸二氢钾、硫酸镁和血清。

优选的，每升培养基中含有以下组分：马铃薯汤40-60g、葡萄糖3-6g、蛋白胨2-4g、酵母浸粉1-2g、磷酸二氢钾0.3-1g、硫酸镁0.1-0.5g和血清。

优选的，每升培养基中含有以下组分：马铃薯汤50g、葡萄糖5g、蛋白胨3g、酵母浸粉1-2g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁0.2g和血清。

优选的，血清包括胎牛血清，所述胎牛血清与培养基的质量比为200:1-1000:1。

优选的，所述培养基中还包括抗细菌抗生素和琼脂粉。

优选的，所述抗细菌抗生素包括氯霉素、青霉素或头孢菌素；所述琼脂粉含量为15-20g/L。

本发明还提供一种上述培养基的制备方法，包括：

步骤S1：将葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、酵母浸粉、硫酸镁和水混合后，得到预混物；

步骤S2：将马铃薯汤加入到所述预混物中，得到混合物；

步骤S3：在所述混合物中加入血清，获得培养基。

优选的，步骤S1还包括：调节pH后，对预混物进行过滤，并除菌；

步骤S2包括：将马铃薯汤加入到所述预混物中，调节pH值后，进行灭菌处理，再添加血清，制备得到真菌检测的培养基；

其中，pH值为6.8-7.2。

优选的，步骤S2中还加入了琼脂粉。

本发明的培养基用于检测细胞制品的真菌污染。

优选的，所述真菌以下任一菌种或它们的组合：黑曲霉、毛霉菌、烟曲霉、孢子霉、白色念珠菌和酵母菌。