[发明专利]一种紫菜突变体库的构建方法在审
申请号: | 202110785421.X | 申请日: | 2021-07-12 |
公开(公告)号: | CN113349052A | 公开(公告)日: | 2021-09-07 |
发明(设计)人: | 孔凡娜;孙斌;殷吉强;茅云翔 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | A01H1/06 | 分类号: | A01H1/06;A01H3/04;A01H13/00;A01G33/02 |
代理公司: | 山东三邦知识产权代理事务所(普通合伙) 37308 | 代理人: | 高洋;牛继梅 |
地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 紫菜 突变体 构建 方法 | ||
1.一种紫菜突变体库的构建方法,其特征在于,步骤如下:
(1)收集紫菜单孢子,将其按104个/mL分散至灭菌海水中,静置后,除去上清;
(2)加入浓度为1-5.0625%(v/v)的诱变剂甲基磺酸乙酯,15℃,避光诱变30-60min;
(3)加入5%硫代硫酸钠溶液,终止诱变,去上清,用灭菌海水清洗;
(4)加入含有PES培养基的海水,先避光培养12h,然后去遮光,正常培养,每3天更换一次培养基;
(5)一段时间后,转入通气瓶中,10℃通气培养;在材料生长至5-7cm时,对其进行性状测定,评价突变体库的质量,进行种质保存。
2.根据权利要求1所述紫菜突变体库的构建方法,其特征在于,所述步骤(2)中的诱变条件是以诱变处理后紫菜孢子的相对萌发率50%为标准,选择的合适诱变条件。
3.根据权利要求1所述紫菜突变体库的构建方法,其特征在于,所述诱变剂甲基磺酸乙酯的浓度为2.25%(v/v)。
4.根据权利要求1所述紫菜突变体库的构建方法,其特征在于,所述诱变时间为30min。
5.根据权利要求1所述紫菜突变体库的构建方法,其特征在于,所述紫菜单孢子由以下方法获得:
①取健康未成熟紫菜剁碎至20-30细胞的碎片,然后用灭菌海水清洗3次;
②将步骤①清洗后的碎片转移至含PES培养基的灭菌海水中,15℃100rpm培养;
③每天镜检观察单孢子放散量,至放散量每个视野≥10个时,将培养液摇匀,计数,过500目筛绢,滤液于3000rpm离心10min,倒去上清,加入少量的灭菌海水重悬孢子,摇晃均匀后计数。
6.权利要求1-5任一项所述方法构建的紫菜突变体库。
7.权利要求6所述紫菜突变体库在紫菜基因功能研究或选育优良种质中的应用。
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