[发明专利]一种海洋链霉菌磷脂酶D突变体和应用有效
| 申请号： | 202110785800.9 | 申请日： | 2021-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN113604453B | 公开（公告）日： | 2023-06-16 |
| 发明（设计）人： | 王永华;王方华;胡荣康;蓝东明;杨博 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/06;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 宫爱鹏 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 海洋 霉菌 磷脂酶 突变体 应用 | ||
1.一种海洋链霉菌磷脂酶D突变体，其特征在于，所述的磷脂酶D突变体的氨基酸序列为SEQID NO:2、SEQID NO:4、SEQID NO:5或SEQID NO:6。
2.一种编码权利要求1所述磷脂酶D突变体的基因，其特征在于，如SEQID NO:2所示磷脂酶D突变体的编码基因为SEQID NO:8，如SEQID NO:4所示磷脂酶D突变体的编码基因为SEQID NO:10，如SEQID NO:5所示磷脂酶D突变体的编码基因为SEQID NO:11，或如SEQIDNO:6所示磷脂酶D突变体的编码基因为SEQID NO:12。
3.一种含权利要求2所述基因的重组基因工程菌。
4.权利要求3所述重组基因工程菌的制备方法，其特征在于，将权利要求2所述基因克隆到表达载体pET-21a、pET-28a或pET-32a上，转化大肠杆菌SHuffle T7感受态细胞，获得重组基因工程菌。
5.权利要求1所述磷脂酶D突变体的应用，其特征在于，所述的磷脂酶D突变体用于生产磷脂酰丝氨酸，将L-丝氨酸加入磷脂酶D突变体的酶液中，大豆卵磷脂加入有机溶剂中，混合后于40±5℃振荡培养12±4h；所述有机溶剂与酶液的体积比为 4：1-4，有机溶剂为乙醚。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述磷脂酶D突变体的酶液为磷脂酶D突变体加入Tris-HCl缓冲液，pH为8。
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