[发明专利]用于全血中稀有细胞高效分离、捕获和回收的方法

说明书

本发明公开了一种用于全血中稀有细胞高效分离、捕获和回收的方法，包括：通道管，所述通道管设有第一管口和第二管口；第一入口，与所述第一管口连通；第二入口，与所述第一管口连通；第三入口，与所述第二管口连通；出口，与所述第二管口连通；目标液通道，所述目标液通道设置在所述通道管内，所述目标液通道与所述第一管口连通，所述目标液通道的通道管壁与所述通道管的内壁之间围成侧液通道,所述侧液通道与所述第二管口连通，所述目标液通道的通道壁上设有若干连通所述侧液通道的微孔，所述微孔的孔径小于目标细胞的体积。步骤S1:目标细胞分离富集；步骤S2:目标细胞冲洗；步骤S3:目标细胞的回收。快速的完成目标细胞的分离、捕获和回收。

技术领域

本发明涉及细胞分离技术领域，特别是涉及一种用于全血中稀有细胞高效分离、捕获和回收的方法。

背景技术

血液中特定的稀有细胞分离富集具有十分重要的医用价值，如干细胞在治疗不同类型疾病、医美等领域应用巨大潜力；循环肿瘤细胞（CTCs）的计数和特性分析可作为乳腺癌转移检测、复发监测、疗效及个性化治疗预后判断的重要依据等。但是血液中干细胞和循环肿瘤细胞（CTCs）含量极少，CTCs含量为血细胞的1/100万，干细胞含量仅占血细胞的0.01%。为了实现干细胞和CTCs等稀有细胞的大规模应用，需从全血中快速高效地分离稀有细胞。

目前多采用微流控技术实现血液中稀有细胞的分离，主要分成主动分离和被动分离。相较于利用额外动力场（电场、磁场、声波和光）来实现细胞分离的主动分离方式，依靠设计结构和流体动力学实现分离的被动分离方式，具有不需要额外力场和附加控制系统、易于制造和组装、系统简单易操作等优点而被广泛应用。其中，基于目标细胞大小分离的过滤式微流控芯片设计最为简单且使用相对灵活，是目前常用的分离方式。

目前基于过滤的微流控芯片中主要有堰、柱、交叉流和膜四种方式，但是其均易出现堵塞且堵塞后会影响后续的分离效率，较难捕获稀有细胞对其分析，同时较难实现芯片内过滤目标细胞的高效回收。

发明内容

本发明旨在旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种用于全血中稀有细胞高效分离、捕获和回收的方法,能够对全血中的目标细胞进行高效的分离、捕获和回收。

根据本发明的第一方面实施例的一种用于全血中稀有细胞高效分离、捕获和回收的方法，包括：

通道管，所述通道管设有第一管口和第二管口；

第一入口，与所述第一管口连通；

第二入口，与所述第一管口连通；

第三入口，与所述第二管口连通；

出口，与所述第二管口连通；

目标液通道，所述目标液通道设置在所述通道管内，所述目标液通道与所述第一管口连通，所述目标液通道的通道管壁与所述通道管的内壁之间围成侧液通道,所述侧液通道与所述第二管口连通，所述目标液通道的通道壁上设有若干连通所述侧液通道的微孔，所述微孔的孔径小于目标细胞的体积；

以及以下步骤：

步骤S1:目标细胞分离富集,所述第二入口、所述第三入口关闭，所述第一入口、所述出口打开，从所述第一入口注入样品液，滤液从所述出口排出，目标细胞被俘获于所述目标液通道中，获初级目标细胞；

步骤S2:目标细胞冲洗，所述第一入口、所述第三入口关闭，所述第二入口、所述出口打开，从所述第二入口注入冲洗液，冲洗液从所述出口排出，完成对目标细胞的冲洗；

步骤S3:目标细胞的回收，所述第二入口、所述出口关闭，所述第一入口、所述第三入口打开，从所述第三入口注入反向冲洗液，反向冲洗液混合所述目标液通道的目标细胞从所述第一入口流出，从而获得目标细胞。

根据本发明实施例的全血中稀有细胞分离、捕获和回收的芯片，至少具有如下有益效果：