[发明专利]一种乳源多肽在制备防治酒精性脂肪肝药物、保健品或食品添加物中的应用

说明书

本发明公开了一种乳源多肽在制备防治酒精性脂肪肝药物、保健品或食品添加物中的应用，通过体外实验证实其可以有效抑制游离脂肪酸（FFAs）诱导的小鼠原代肝细胞内脂质堆积；在体研究发现其具有降低高脂饮食诱导的脂肪肝小鼠模型肝脏体重比、减少脂质积聚的功效。因此，该乳源多肽及其嵌合多肽可用于在制备防治脂肪肝的药物、保健品以及食品添加物。

技术领域

本发明涉及多肽和代谢调控领域，具体地说涉及一种乳源多肽在制备防治酒精性脂肪肝药物、保健品或食品添加物中的应用。

背景技术

随着肥胖和代谢综合征的全球化流行，非酒精性脂肪肝的发病率逐年上升且呈低龄化趋势，已经成为我国第一大肝病。作为代谢综合征的重要组成，非酒精性脂肪肝不仅与心脑血管疾病密切相关，还可发展为肝硬化、肝癌，最终导致 30%-40%的患者死亡，严重威胁人类健康。非酒精性脂肪肝的治疗尚无理想的药物，目前以控制饮食、改变不良生活方式为主，但耗时长、见效慢且易反复。因此，积极探索防治非酒精性脂肪肝的新手段迫在眉睫。

脂质代谢紊乱是非酒精性脂肪肝发生的关键环节之一。肝脏作为能量代谢的中心器官，是脂质合成与分解的重要场所。在正常生理状态下，肝细胞内的脂质处于合成与分解的动态平衡之中，一旦这种平衡被打破，就会使肝细胞中的游离脂肪酸（Free FattyAcids, FFAs）大量累积，甘油三酯含量剧增进而发生脂肪变性，最终导致非酒精性脂肪肝。近年来多肽因其具有分子量低、单位活性好、易于合成制备的特点，成为各大药企研发的焦点。因此，从多肽角度寻找调控脂质代谢的新途径，或许能为非酒精性脂肪肝的防治提供新思路。

发明内容

发明目的：本发明的目的是提供一种乳源多肽或嵌合多肽在用于制备治疗非酒精性脂肪肝药物中的应用，以及在用于制备降低高脂诱导肝细胞脂质堆积的药物中的应用；并对该多肽在细胞水平和腹腔注射的有效浓度进行确定。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明所述乳源多肽包含SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，β-酪蛋白第113-120位氨基酸，本领域技术人员可通过生物工程技术扩增、表达获得，也可通过化学合成方法（例如固相/液相合成方法）获得。该乳源多肽作为活性氨基酸序列，可与一条穿膜氨基酸序列形成的嵌合多肽，所述穿膜氨基酸序列位于活性氨基酸序列的N端。

对于上述的乳源多肽或嵌合多肽，经研究发现了其可用于治疗非酒精性脂肪肝，降低高脂诱导肝细胞脂质堆积。因此可被进一步用于开发脂肪肝防治、养肝护肝的药物。

作为本发明的优选方案，所述穿膜氨基酸序列包括至少一段寡聚精氨酸序列，所述穿膜氨基酸序列中精氨酸数量的占比不低于40%。

更优选地，所述穿膜氨基酸序列含有活性氨基酸序列N端依次连接的谷氨酰胺、脯氨酸的寡聚氨基酸片段，这些寡聚氨基酸形成的穿膜氨基酸序列可有效连接活性序列，高效转运穿越细胞膜且不会引发免疫反应。所述寡聚氨基酸片段为至少2个相邻且相同的氨基酸组成的短肽。

进一步的，作为本发明的最优方案，所述嵌合多肽选自如下氨基酸序列：

SEQ ID NO.2: GRKKRRQRRRVKEAMAPK，

SEQ ID NO.3: GRKKRRQRRRPPQVKEAMAPK，

SEQ ID NO.4: GRKKRRQRRRPPQQVKEAMAPK。

对于上述SEQ ID NO.1 - SEQ ID NO.4所示的多肽序列，可进行必要的修饰，包括但不限于特定基团的保护/去保护，C端和/或N端和/或侧链的酰基化、烷基化、酰胺化、酯基化，以及其他特殊偶联或螯合修饰。通常地，可在N端添加羧基，C端添加羟基或氨基进行修饰。