[发明专利]一种用于肝癌细胞立体培养基质材料，制备方法及医药应用

说明书

本发明公开了一种用于肝癌细胞立体培养的基质材料，制备方法及其医学应用。所述立体细胞培养材料包括基于巯基‑醛基偶联而成基质材料，涉及前体组分：成分A、B和C三种溶液，其中A为含巯基的高分子生物材料溶液；B为含醛基的小分子生物材料溶液；C为含细胞活性成分溶液。制备方法：先将A和C预混静置，再加入B混匀形成基质材料。本发明提供了运用该基质材料进行肝癌细胞立体培养的方法，药敏分析及其它应用。运用本基质材料，肝癌细胞接种后，连续培养若干天，即可获得细胞立体球状结构，可用于抗癌药物的筛选及毒副作用分析等。本发明极大提高肝癌细胞立体培养效率，可降低实验成本，缩短检测周期，适合肝癌细胞立体培养及医学应用研究。

技术领域

本发明属于医药应用领域，涉及可用于肝癌细胞立体培养的基质材料和其制备方法，以及防治肝癌的医药用途。

背景技术

目前，大部分细胞培养方式是使细胞在塑料培养皿表面生长，形成单层细胞，属于二维生长。实际上在体内，细胞并不是简单的以单层结构存在，而是相互粘连相互依存，形成细胞被其他细胞、组织和细胞外基质重重包围，体内细胞生长与体外单层细胞培养环境完全不同。相应地，基于二维生长方式来研究药物很大程度上不能真实反映体内药物应用及所处的复杂情况。

目前药物研发过程中所用到的细胞模型多为二维培养的单层细胞，此种方式有着其独特优势，如易培养、成本低、培养周期短、可以快速应用于实验中。当然局限性也非常明显，比如缺乏细胞外基质成分，难以形成营养成分/药物浓度梯度，细胞间的接触只局限于一个面，不能有效模拟在体细胞的行为，尤其是细胞的耐药性。三维细胞培养模型则能很好地模拟在体细胞微环境及细胞间接触和相互作用，营养成分和药物都需要渗透至内层细胞，会形成相应的浓度梯度，实验得到的结果也更加可靠，预测性更强。

肝癌是恶性程度高、预后差的疾病，在我国是属于第2位的肿瘤。肝癌可分为原发性和继发性两大类。原发性肝脏恶性肿瘤起源于肝脏的上皮或间叶组织，前者称为原发性肝癌，是我国高发的，危害极大的恶性肿瘤；后者称为肉瘤，与原发性肝癌相比较较为少见。继发性或称转移性肝癌系指全身多个器官起源的恶性肿瘤侵犯至肝脏。一般多见于胃、胆道、胰腺、结直肠、卵巢、子宫、肺、乳腺等器官恶性肿瘤的肝转移。近二十年来，随着医学物理学、影像学、麻醉学、免疫学、分子生物学的不断发展以及外科技术的日臻成熟，我国原发性肝癌的治疗取得了长足的进步，手术切除率、术后生存率、及术后生活质量均有较大提高。但与其他肿瘤治疗相比，肝癌的疗效远未如人意，究其原因除肝癌本身的生物学特性决定了其预后外，治疗方法的选择、病人甚至医生的治疗观念亦是影响疗效的重要因素。

本发明选择肝癌作为研究对象，探索最适其三维培养的基质材料，制备方法及其在抗肝癌的医药研究中的应用。

发明内容

一种用于肝癌细胞立体培养的基质材料，其特征在于，原材料及制备方法：分别制备成分A溶液，成分B溶液和成分C溶液，其中成分A溶液为含巯基的高分子生物材料溶液；成分B 溶液为含醛基的小分子生物材料溶液；成分C溶液是细胞活性因子溶液。将成分A溶液和成分C 溶液按比例混合制得预混液，然后再与成分B溶液进行混合即得基质材料。

本发明目的是建立一种适合肝癌细胞立体培养的基质材料，并将其应用于肝癌细胞的三维培养的医药学研发与临床应用的用途。具体涉及基质材料的制备方法与工艺，从而建立适合肝癌细胞三维培养的试剂组合及配比，及其用肝癌细胞三维培养及试剂盒。

本发明是通过一下技术方案实现的：

一种基质材料的配制，涉及含巯基的高分子生物材料溶液(成分A溶液)和含醛基的小分子生物材料溶液(成分B溶液)。

其中，成分A溶液和成分B溶液配比为(0.008～8):(0.005～2)。

其中，所述成分A溶液成分如下，其中n≥2：

所述成分B溶液成分如下，B溶液中含醛基小分子生物材料的结构式如下。