[发明专利]一种用于乳腺癌细胞立体培养基质材料，制备方法及医药应用

说明书

本发明公开了一种用于乳腺癌细胞立体培养的基质材料，制备方法及其医学应用。所述立体细胞培养材料包括基于巯基‑醛基偶联而成基质材料。涉及前体组分：成分A、B和C三种溶液，其中A为含巯基的高分子生物材料溶液；B为含醛基的小分子生物材料溶液；C为含黏附因子溶液。制备方法：先将A和C预混静置，再加入B混匀形成基质材料。本发明提供了运用该基质材料进行乳腺癌细胞立体培养的方法，药敏分析及其它应用。运用本基质材料，乳腺癌细胞接种后，连续培养若干天，即可获得细胞立体球状结构，可用于抗癌药物的筛选及毒副作用分析等。本发明极大提高乳腺癌细胞立体培养效率，易于操作，缩短检测周期，适合乳腺癌细胞立体培养及医学应用研究。

技术领域

本发明属于医药应用领域，涉及可用于乳腺癌细胞立体培养的基质材料和其制备方法，以及防治乳腺癌的医药用途。

背景技术

目前，大部分细胞培养方式是使细胞在塑料培养皿表面生长，形成单层细胞，属于二维生长。实际上在体内，细胞并不是简单的以单层结构存在，而是相互粘连相互依存，形成细胞被其他细胞、组织和细胞外基质重重包围，体内细胞生长与体外单层细胞培养环境完全不同。相应地，基于二维生长方式来研究药物很大程度上不能真实反映体内药物应用及所处的复杂情况。

目前，国内外药物研发过程中所用到的细胞模型多为二维培养的单层细胞，该方式虽然有其独特优势，如：易培养、成本低、培养周期短、可以快速应用于实验中。但是，局限性也非常明显，比如：缺乏细胞外基质成分，难以形成营养成分/药物浓度梯度，细胞间的接触只局限于一个面，不能有效模拟在体细胞的行为，尤其是细胞的耐药性。三维细胞培养模型则能很好地模拟在体细胞微环境及细胞间接触和相互作用，营养成分和药物都需要渗透至内层细胞，会形成相应的浓度梯度，实验得到的结果也更加可靠，预测性更强。

全球肿瘤流行病统计数据(GLOBOCAN)认为，乳腺癌是中国女性最常见的癌症，年龄标化率(ASR)为每10万人21.6例。根据中国国家肿瘤登记中心的数据，乳腺癌是城市女性最常见的癌症，是农村女性第四大常见癌症。城市地区的ASR(34.3例/10万女性)是农村地区的2倍(17.0例/10万女性)。

在中国，癌症的健康负担逐年增长，每年超过160万人诊断为癌症，120万因癌症而死亡。与其他大多数国家一样，乳腺癌也成为了中国女性最常见的癌症；每年中国乳腺癌新发数量和死亡数量分别占全世界的12.2％和9.6％。

在中国，诊断为乳腺癌的平均年龄为45-55岁，比西方女性更加年轻。来自上海和北京的数据显示了乳腺癌的两个发病高峰，第一个出现在45-55岁之间，另一个出现在70-74岁之间，并且诊断为乳腺癌的中位年龄有逐渐增大的趋势。2008年，中国16.6％的乳腺癌患者年龄大于等于65岁(美国为42.6％)，预计到2030年，这一数字将提高到27.0％。

社会经济发达的沿海城市发病率最高，广州乳腺癌ASR为46.6例/10万女性，这一比率与日本接近(ASR：42.7例/10万女性)。相反，在中西部欠发达地区，乳腺癌ASR可低于7.94例/10万女性。

本发明选择乳腺癌作为研究对象，探索最适其三维培养的基质材料，制备方法及其在抗乳腺的医药研究中的应用。

发明内容

一种用于乳腺癌细胞立体培养的基质材料，其特征在于，原材料及制备方法：分别制备成分A溶液，成分B溶液和成分C溶液，其中成分A溶液为含巯基高分子生物材料溶液；成分B 溶液为含醛基高分子生物材料溶液；成分C溶液是含有黏附因子的溶液。将成分A溶液和成分 C溶液按比例混合制得预混液，然后再与成分B溶液进行混合即得基质材料。

本发明目的是建立一种适合乳腺癌细胞立体培养的基质材料，并将其应用于乳腺癌细胞的三维培养的医药学研发与临床应用的用途。具体涉及基质材料的制备方法与工艺，从而建立适合乳腺癌细胞三维培养的试剂组合及配比，及其用乳腺癌细胞三维培养及试剂盒。

本发明是通过以下技术方案实现的：