[发明专利]一种提高乳酸化学纯度的发酵方法

权利要求书

1.一种提高乳酸化学纯度的发酵方法，其特征在于，所述发酵方法包括以下步骤：

1)将菌种活化之后接种到种子培养基中培养，得到种子液；

2)将步骤1)得到的所述种子液与已灭菌的葡萄糖和已灭菌的培养基混合发酵，在产酸阶段加入乙酰乳酸脱羧酶，最终得到所述乳酸。

2.根据权利要求1所述的一种提高乳酸化学纯度的发酵方法，其特征在于，所述步骤1)中的菌种优选为大肠杆菌或酿酒酵母。

3.根据权利要求1或2所述的一种提高乳酸化学纯度的发酵方法，其特征在于，所述步骤1)中的菌种活化包括：菌种在平板培养皿中进行平板划线以后，在35-40℃培养箱中活化培养10-15h；优选地，步骤(1)所述种子培养基包括LB培养基、SOB培养基、SOC培养基或TB培养基中任意一种。

4.根据权利要求1～3任一项所述的一种提高乳酸化学纯度的发酵方法，其特征在于，所述步骤1)中的种子培养基中培养包括：将活化后的菌种转接到种子培养基中，35-40℃培养9.5-12h后得到种子液。

5.根据权利要求1～4任一项所述的一种提高乳酸化学纯度的发酵方法，其特征在于，所述步骤2)中所述种子液接种的比例为1-20％(质量分数)。

6.根据权利要求1～5任一项所述的一种提高乳酸化学纯度的发酵方法，其特征在于，所述步骤2)中加入的乙酰乳酸脱羧酶的加入量为0.05-5g/L；优选地，所述加入的乙酰乳酸脱羧酶的加入量为1-5g/L；更优选地，所述加入乙酰乳酸脱羧酶的加入量为3-5g/L。

7.根据权利要求1～6任一项所述的一种提高乳酸化学纯度的发酵方法，其特征在于，所述步骤2)中发酵的培养基包括葡萄糖、Na₂HPO₄·12H₂O、KH₂PO₄、NH₄Cl和NaCl，在发酵开始之前加入千分之一1mol/L的MgSO₄和千分之一的微量元素；所述葡萄糖、Na₂HPO₄·12H₂O、KH₂PO₄、NH₄Cl和NaCl在发酵体系中的终浓度分别为5-60g/L、15-16g/L、2.5-3.5g/L、0.8-1.2g/L和0.4-0.6g/L；

优选地，所述微量元素包括FeCl₃·6H₂O、CoCl₂·6H₂O、CuCl₂·2H₂O、ZnCl₂、Na₂MoO₄·2H₂O、H₃BO₃和MnCl₂·4H₂O；

更优选地，所述FeCl₃·6H₂O、CoCl₂·6H₂O、CuCl₂·2H₂O、ZnCl₂、Na₂MoO₄·2H₂O、H₃BO₃和MnCl₂·4H₂O在发酵体系中的终浓度分别为2-3g/L、0.2-0.4g/L、0.1-0.2g/L、0.2-0.4g/L、0.2-0.4g/L、0.07-0.08g/L和0.49-0.5g/L。

8.根据权利要求1～7任一项所述的一种提高乳酸化学纯度的发酵方法，其特征在于，所述步骤2)中所述发酵的温度为36-43℃。