[发明专利]空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A试剂盒的应用及检测方法

说明书

本发明涉及一种空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其检测方法。试剂盒包括：酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品；其中，校准品包括不同浓度SAA抗原的校准品和0.1M磷酸盐稀释液；酶标记物包括过氧化物酶标记的SAA检测抗体和0.05M磷酸盐缓冲液；发光标记物包括9,10‑二氢吖啶标记的SAA捕获抗体和0.05M Tris缓冲液；辅助剂包括发光辅助剂和枸橼酸盐缓冲液。本发明采用试剂空间邻近发光分析检测技术，其作为一种真正意义上的均相化学发光技术，无需清洗、无需载体，没有包被过程，检测灵敏度高，特异性强，使得检测结果更真实可信；同时优化了反应时间和反应步骤，使操作更简单。

本申请是申请日为2018年09月25日、申请号为201811115981.9、发明名称为《空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其检测方法》的分案申请。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其检测方法。

背景技术

感染性疾病是临床常见病和多发病，主要是由细菌、病毒和/或真菌等病原体入侵体内引起的炎性反应，多数伴有发热症状。抗菌药物治愈和挽救了众多患者生命的同时，其不合理应用和滥用也导致了众多不良后果，如细菌出现广泛、严重的耐药性。

血清淀粉样蛋白是由104个氨基酸组成的多肽，其在天然状态时的相对分子质量约为12000～14000，血清的基因位于第11号染色体是近年发现的一种敏感的炎症标志物，是一种急性期反应蛋白，在急慢性炎性反应时，浓度明显升高，可达正常的1000倍以上；同时，在细菌和病毒感染的早期均可明显升高，创伤、烧伤等应激状态下也会快速增高。

血清淀粉样蛋白A(SAA)是一种与心血管疾病发生有密切联系的细胞炎症因子，水平的升高与心血管疾病的发生呈正相关，并且能够早期预测心血管疾病终末事件。已有研究表明：在细菌、真菌、病毒感染、动脉粥样硬化、心血管疾病、急性移植排斥反应、肿瘤等疾病中均可检测到血清SAA升高。与C-反应蛋白(CRP)类似，SAA有助于诊断炎症、并评估其治疗效果，但在某些疾病中，如病毒感染、心血管疾病、移植排斥反应等方面SAA敏感性可高于C-反应蛋白，能为临床诊断提供更好的参考价值。

SAA联合检测CRP能提高对感染的诊断灵敏度。SAA在病毒感染性疾病中，SAA显著升高，CRP不升高；因此，SAA可以作为诊断病毒感染的敏感指标。SAA联合CRP检测，可鉴别诊断细菌、病毒感染，又能提供新依据，可靠性更强，动态观察疗效并可指导临床用药。SAA联合CRP检测，有利于小儿感染性疾病(新生儿败血症、脓毒症)的早期诊断。

目前临床多采用ELISA和散射比浊法，这两种方法线性范围窄，灵敏度低，重复性差。此外，ELISA，需要固相载体(如微孔板)，且反应完成后均需要对反应复合物进行清洗，以去除未结合的游离成分。其操作复杂，影响因素多，从而造成检测结果不稳定，重复性不佳。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明目的在于提供一种空间邻近化学发光法检测血清淀粉样蛋白A的试剂盒及其检测方法。该法作为一种真正意义上的均相化学发光技术，无需载体，没有包被、洗涤过程，试剂盒组分少，且灵敏度高、重复性好、操作简单。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案为：

第一方面，本发明提供一种血清淀粉样蛋白A的检测试剂盒，试剂盒包括：酶标记物、发光标记物、辅助剂、触发剂和校准品；其中，酶标记物的原料组分包括过氧化物酶标记的SAA检测抗体，发光标记物的原料组分包括9,10-二氢吖啶标记的SAA捕获抗体。