[发明专利]CLDN18.2结合分子及其用途

说明书

本发明涉及特异性CLDN18.2结合分子以及含有所述CLDN18.2结合分子的免疫缀合物、组合物。本发明还涉及编码所述CLDN18.2结合分子的核酸及包含其的宿主细胞，以及制备所述CLDN18.2结合分子的方法。此外，本发明涉及这些CLDN18.2结合分子的治疗和诊断用途。特别地，本发明涉及这些CLDN18.2结合分子与其它疗法，例如治疗方式或治疗剂的联合治疗。

本发明涉及特异性CLDN18.2结合分子以及含有所述CLDN18.2结合分子的免疫缀合物、组合物。此外，本发明涉及编码所述CLDN18.2结合分子的核酸及包含其的宿主细胞，以及制备所述CLDN18.2结合分子的方法。本发明还涉及这些CLDN18.2结合分子的治疗和诊断用途，特别地，本发明还涉及这些CLDN18.2结合分子与其它疗法，例如治疗方式或治疗剂的联合治疗。

背景技术

CLDN18属于Claudins蛋白家族成员，由Shoichiro Tsukita等在1998年发现，其是构成上皮细胞紧密连接的重要分子，决定了上皮细胞的渗透性，也起到阻挡细胞膜表面蛋白和脂质扩散的作用(Gunzel,D.和A.S.Yu(2013).Claudins and the modulation oftight junction permeability.Physiol Rev 93(2):525-569)。人的CLDN18基因具有两个不同的1号外显子，转录后经过可变剪接最终生成仅在N端具有不同序列的两个蛋白亚型CLDN18.1和CLDN18.2。这两种CLDN18亚型蛋白均由261个氨基酸组成，具有四个跨膜结构域，但是两者分布于不同的组织，CLDN18.1主要表达在肺组织中，CLDN18.2仅表达在分化的胃粘膜上表皮细胞上，不表达在胃干细胞上(Sahin,Ugur等人，Claudin-18splicevariant 2is a pan-cancer target suitable for therapeutic antibodydevelopment.ClinicalCancer Research14.23(2008):7624-7634)。

CLDN18.2在多种肿瘤组织中高度表达，比如非小细胞肺癌(25％)、胃癌(70％)、胰腺癌(50％)和食道癌(30％)，但是在正常组织中几乎没有表达(Kumar,V.等人，(2018)Emerging Therapies in the Management of Advanced-Stage Gastric Cancer.FrontPharmacol 9:404)，由于其在肿瘤细胞和正常组织中的表达差异性，目前已经成为非常有潜力的一个抗肿瘤药物作用靶点。

截止目前，以CLDN18.2为靶点的药物中进展最快的是德国Ganymed公司研制的IMAB362，IMAB362是一种特异靶向CLDN18.2的人鼠嵌合IgG1单抗，其与肿瘤细胞上表达的CLDN18.2第1个胞外区结合，通过抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)来诱导肿瘤细胞死亡。IMAB362在胃癌二期试验中比标准化疗显著延长患者生存期(标准化疗的生存期为8.4个月；而IMAB362治疗的生存期为13.2个月)，IMAB362的治疗效果在Claudin18.2高表达患者中的优势更明显。

虽然目前已有靶向CLDN18.2靶点的临床在研单克隆抗体药物，但单克隆抗体(150kD)存在分子质量较大，难穿透组织，造成肿瘤区域的有效浓度较低，治疗效果不充分的问题，作为治疗剂，仍有继续开发靶向CLDN18.2靶点的小分子抗体的迫切需要。

单结构域抗体(single domain antibody,sdAb)(例如，纳米抗体)是目前最小的抗体分子，其分子量是普通抗体的1/10。单结构域抗体除具备单克隆抗体的抗原反应性外，还拥有一些独特的功能特性，例如，它们通常表现出较高的溶解度、良好的热稳定性、组织渗透性和耐受木瓜蛋白酶等的降解；此外，单结构域抗体可以在酵母、植物和哺乳动物细胞等多种宿主细胞中表达且表达量较高，使得其具有极高的成本优势。因此本领域希望开发新的亲和力更高的结合CLDN18.2的单结构域抗体(sdAb)。

发明概述