[发明专利]黄芩苷在制备抗慢性粒细胞白血病耐药性药物中的应用

说明书

本发明公开一种黄芩苷在制备抗慢性粒细胞白血病耐药性药物中的应用，属于生物医药领域。本发明通过伊马替尼浓度浓度递增的方法成功构建了BCR‑ABL1非依赖性耐药的CML耐药细胞株：K562‑IMR和KCL22‑IMR。通过MTT法检测证明黄芩苷能抑制K562‑IMR和KCL22‑IMR细胞增殖；且黄芩苷能显著抑制K562‑IMR、KCL22‑IMR细胞的克隆形成能力。同时，黄芩苷对BCR‑ABL1诱导的白血病模型小鼠中白血病干细胞具有显著的抑制作用。黄芩苷能够抑制靶蛋白MCL1的表达，还可通过靶蛋白MCL1抑制白血病干细胞的自我更新，进而克服CML中BCR‑ABL1非依赖性耐药性。

技术领域

本发明属于生物医药领域，特别涉及一种黄芩苷在制备抗慢性粒细胞白血病耐药性药物中的应用。

背景技术

慢性粒细胞白血病(Chronic MyeloidLeukemia，CML)是血液系统中造血干细胞以髓系增生为特点的恶性克隆增殖性疾病。其典型的遗传学特征为发生易位形成费城染色体，并由此产生BCR-ABL1融合基因。慢性粒细胞白血病是危害人类健康的血液系统恶性肿瘤，约占成人新发白血病的15％，CML的临床过程可分为慢性期(CP)，加速期(AP)和爆炸期(BP)^[1]。在引入TKI(酪氨酸激酶抑制剂)之前，治疗的主要手段是干扰素α(IFN-α)和干细胞移植^[2]。对IFN-α的反应很少持久，并且治疗与大量毒性相关，这种治疗伴随着明显的发病率和死亡率，并且仅对少数患者可用^[3]。BCR-ABL1融合基因是导致CML的主要因素，因此被作为药物靶点广泛研究。

伊马替尼(Imatinib，IM)的出现正是针对这一靶点设计的，作为首个获批上市的BCR-ABL1抑制剂，在CML的一线治疗用药取得了巨大的成功。酪氨酸激酶抑制剂(TKI)是一种小分子抗肿瘤药物，被称为革命性的分子靶向药物，对慢性粒细胞白血病、pH阳性的急性淋巴细胞白血病等具有良好的疗效^[4]。在前期的治疗中，第一代酪氨酸激酶抑制剂(TKI)伊马替尼能够使患者得到有效的治疗，显著延长患者的生存期，其治疗后患者10年存活率可达83.3％^[5]。但是接受伊马替尼治疗的CML患者中，约有25％会产生耐药性^[6]，从而导致药物疗效明显减弱。而产生CML伊马替尼耐药临床上主要分为BCR-ABL1依赖性耐药和BCR-ABL1非依赖性耐药两种机制。BCR-ABL1依赖性耐药的机制主要是通过ABL激酶结构域的突变^[7]，BCR-ABL1过表达^[8]或MDR1上调^[9]介导的。由BCR-ABL1基因突变引起为主，主要影响T315，这种突变会干扰IM与BCR-ABL1的结合，这一突变大大减弱了伊马替尼对CML的敏感性^[10]。但是第三代TKI帕纳替尼的出现，能有效治疗CML患者伴T315I突变，伴随着一些副作用外，已基本得到缓解^[11]。

另一方面，BCR-ABL1非依赖性耐药是与BCR-ABL1无关的TKI抗性，其潜在机制尚未得到很好的理解。BCR-ABL1非依赖性耐药的原因很多，包括CML白血病干细胞^[12]、JAK-STAT信号的过度激活^[13]、几种跨膜药物转运蛋白的多态性^[14]等。由于这种耐药机制复杂目前临床还没有统一有效的治疗方案，因此近年成为白血病研究的热点之一。