[发明专利]一种用于对银杏基因进行筛选和功能分析的cDNA芯片

说明书

本发明涉及cDNA芯片技术领域，并提出一种用于对银杏基因进行筛选和功能分析的cDNA芯片制备方法，包含以下步骤：S1、银杏叶的选取，选取多个适合制取芯片的银杏叶，留作备用；S2、配置银杏叶消毒液，将上述S1中的银杏叶加入消毒液中进行消毒；S3、将S2中的银杏叶捞出进行洗净备用，然后对洗净的银杏叶进行烘干、切片；S4、从S3中的银杏叶中提取其RNA，然后逆转录成cDNA，预置在PCR反应板内，从而制成cDNA芯片；S5、从S3中选取多个样品进行S4的操作，从而得到多个cDNA芯片。该发明将预制好的cDNA芯片放置于湿盒中水化，然后取出放置在75‑110℃的平台上烘干40‑55秒，最后进行紫外线照射20‑30分钟后进行固定后进行杀毒，提高了银杏叶cDNA芯片的活性。

技术领域

本发明涉及cDNA芯片技术领域，具体为一种用于对银杏基因进行筛选和功能分析的cDNA芯片。

背景技术

cDNA芯片与DNA芯片一样归属于基因芯片，它是指对各种生物随机克隆和随机测序所得的cDNA片段进行归类，并把每一类cDNA片段的代表克隆经过体外扩增，得到大小和序列不同的片段分别经过纯化后，利用机械手高速将它们高密度有序地点样固定在玻片硅晶片或尼龙膜上，从而制备成cDNA微阵列，以此对各基因的表达情况进行同步分析。

随着芯片技术的发展，人们已经开始利用cDNA芯片进行基因的筛选与功能分析，从而提出来一种用于对银杏基因进行筛选和功能分析的cDNA芯片，但是cDNA芯片的制备十分不易，并且在制备过程中需要注意不能受到外界污染，为此提出一种用于对银杏基因进行筛选和功能分析的cDNA芯片制备方法。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供用于对银杏基因进行筛选和功能分析的cDNA芯片及其制备方法，由以下具体技术手段所达成：

本发明为实现技术目的采用如下技术方案：一种用于对银杏基因进行筛选和功能分析的cDNA芯片制备方法，包含以下步骤：

S1、银杏叶的选取，选取多个适合制取芯片的银杏叶，留作备用；

S2、配置银杏叶消毒液，将上述S1中的银杏叶加入消毒液中进行消毒；

S3、将S2中的银杏叶捞出进行洗净备用，然后对洗净的银杏叶进行烘干、切片；

S4、从S3中的银杏叶中提取其RNA，然后逆转录成cDNA，预置在PCR反应板内，从而制成cDNA芯片；

S5、从S3中选取多个样品进行S4的操作，从而得到多个cDNA芯片；

S6、将预制好的cDNA芯片放置于湿盒中水化，然后取出放置在75-110℃的平台上烘干40-55秒，最后进行紫外线照射20-30分钟后进行固定。

其中，步骤S1中的银杏叶选取自同一棵银杏树的不同部位，选取自同一棵银杏树可以保证样本的基因相同，而从同一颗银杏树的不同部位。

其中，步骤S3中将银杏叶切成相同规格的切片，然后对切片进行统一处理，相同规格的切片是为了方便银杏叶cDNA芯片的制备。

其中，提取RNA时向提取液中加入氯仿，氯仿是分子量比较大的有机溶剂，在提取RNA时，氯仿可以有效地使有机相和无机相迅速分离，RNA提取过程，有机相中主要是酚和蛋白结合，从而使得蛋白和RNA脱离，RNA进入水相。

其中，cDNA芯片要经过PCR反应扩增每个基因克隆，然后PCR产物纯化后溶解在芯片核酸点样溶液中，通过高精度芯片点样仪完成芯片点制。

与现有技术相比，本发明提供了一种用于对银杏基因进行筛选和功能分析的cDNA芯片，具备以下有益效果：