[发明专利]一种葫芦巴中薯蓣皂苷的制备方法

说明书

本发明提供了一种葫芦巴中薯蓣皂苷的制备方法，属于分离纯化技术领域。本发明以葫芦巴为原料，采用泡沫分离法结合制备型高效液相色谱(P‑HPLC)法对葫芦巴中的薯蓣皂苷进行分离纯化，建立薯蓣皂苷单体的制备方法，对所得的单体化合物进行结构定性确定其为薯蓣皂苷。结果表明，该方法具有操作简单、分离周期短、效率高等特点，适用于葫芦巴中薯蓣皂苷的分离制备，为葫芦巴中薯蓣皂苷的分离纯化以及规模化生产提供理论依据和技术参考。

技术领域

本发明涉及分离纯化技术领域，尤其涉及一种葫芦巴中薯蓣皂苷的制备方法。

背景技术

葫芦巴(Trigonella foenum-graeeum,L.)，又名大叶芸香草、香苜蓿，是一种生存力极强的一年生草本植物，系豆科植物蝶形花亚科，它起源于南欧、西亚和地中海地区，自古以来被用作香料及调味剂。葫芦巴种子中含有丰富的化学成分，如半乳甘露聚糖、甾体皂苷类、黄酮类、生物碱类、三萜类和香豆素类等，药理作用非常广泛。甾体皂苷类可以降低血清总胆固醇的含量，抑制胆固醇的吸收，又是合成甾体激素药物的中间体，葫芦巴中甾体皂苷含量约为6.5％，而薯蓣皂苷是甾体皂苷的主要化学成分。因此，薯蓣皂苷作为葫芦巴甾体皂苷类的主要成分在全世界受到广泛关注。

目前，薯蓣皂苷的传统纯化方法主要有大孔树脂吸附法、膜分离法、高速逆流色谱法和柱层析法，但这些方法存在耗时长、分离纯化步骤繁琐的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种葫芦巴中薯蓣皂苷的制备方法，该方法具有操作简单、分离周期短和效率高等特点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种葫芦巴中薯蓣皂苷的制备方法，包括以下步骤：

将葫芦巴粉与醇溶剂混合，进行提取，得到提取液；

将所述提取液进行泡沫分离，得到薯蓣皂苷粗产物；

采用制备型高效液相色谱将所述薯蓣皂苷粗产物进行分离纯化，得到薯蓣皂苷。

优选的，所述醇溶剂包括乙醇溶液；所述乙醇溶液的质量浓度为60～80％；所述葫芦巴粉的质量与醇溶剂的体积之比为1g:(20～40)mL。

优选的，所述提取的压力为300～400MPa，时间为6～12min。

优选的，所述提取后，还包括将提取所得料液依次进行减压抽滤和浓缩。

优选的，所述泡沫分离的条件为：上样浓度0.01～0.05mg/mL，温度25～45℃，气速350～550mL/min，装液量250～450mL。

优选的，所述泡沫分离的条件为：上样浓度0.03mg/mL，温度28℃，气速450mL/min，装液量400mL。

优选的，所述制备型高效液相色谱的色谱条件包括：流动相：水和乙腈；0～5min，体积分数5～15％乙腈；5～15min，体积分数15～45％乙腈；15～35min，体积分数45～100％乙腈；流速为10mL/min；进样量为5mL。

优选的，所述制备型高效液相色谱的色谱条件还包括：色谱柱：HederaODS-2柱，20×250mm，10μm；检测波长208nm。