[发明专利]引物探针组合物及其在制备副流感病毒分型检测试剂盒中的应用

说明书

本发明公开了一种引物探针组合物在制备副流感病毒分型检测试剂盒的应用，该引物探针植物组合物至少包括用于检测副流感病毒4a型的引物和探针，以及用于检测副流感病毒4b型的引物和探针；本发明所述的引物探针组合物能够对副流感病毒4a型和4b型进行特异性分型，且检测灵敏度高，据检测，该引物探针组合物对副流感病毒4a型的最低检出限为4.8×10¹copies/μL，对副流感病毒4b型的最低检出限为5.2×10¹copies/μL，灵敏度高；同时该引物探针组合物能够特异性地对副流感病毒4a型和4b型进行分型，与副流感病毒1型、2型或3型均不存在交叉反应，特异性极强，能够快速、准确地对副流感病毒进行分型检测。

技术领域

本发明属于病毒检测技术领域，特别涉及一种引物探针组合物及其在制备副流感病毒分型检测试剂盒中的应用。

背景技术

副流感病毒是属于副黏病毒属的一类有包膜的单股负链RNA病毒，是一种常见的呼吸道感染病原体，主要引起婴幼儿及儿童严重的下呼吸道感染疾病，目前缺乏有效的治疗药物和病毒疫苗。

根据遗传性和抗原性，副流感病毒可以分为1型、2型、3型和4型，1-3型副流感病毒是较为常见的引起婴幼儿急性呼吸道感染的重要病原体，4型仅会引起症状较轻的婴幼儿呼吸道感染，且4型又可进一步分为4a型和4b型。副流感病毒所引起的感染症状和流感病毒较为相似，仅依靠临床症状及常规的检测方法进行病毒病原的确定并不可靠。因此早期快速对呼吸道病毒感染的病原进行诊断能够及时指导临床治疗，为合理选择抗病毒药物提供依据，避免药物滥用。

为了解决上述问题，目前市面上已出现较多能够对副流感病毒1型、2型、3型和4型进行分型的试剂盒，如公开号为CN108676913A的中国发明专利申请公开的一种人副流感病毒核酸免提取基因分型检测试剂盒；也有少量能够对副流感病毒4a型和4b型进行分型的试剂盒，如公开号为CN108998574A的中国发明专利申请公开的一种人副流感病毒4型核酸检测试剂盒。

上述试剂盒中所采用的引物和探针虽然对副流感病毒4a型和4b型具有优异的检测灵敏度，但特异性仍旧较低，不能有效区分人副流感病毒1型和4型。

发明内容

本发明的发明目的是提供一种引物探针组合物，该引物探针组合物能够对副流感病毒4a型和4b型进行分型检测，且特异性强、灵敏度高。

为实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：

一种引物探针组合物，其特征在于，至少包括用于检测副流感病毒4a型的引物和探针，以及用于检测副流感病毒4b型的引物和探针；

其中，所述的用于检测副流感病毒4a型的引物和探针包括：具有如SEQ No.10所示核苷酸序列的正向引物、具有如SEQ ID No.11所示核苷酸序列的反向引物以及具有如SEQID No.12所示核苷酸序列的探针；

所述的用于检测副流感病毒4b型的引物和探针包括：具有如SEQ No.13所示核苷酸序列的正向引物、具有如SEQ ID No.14所示核苷酸序列的反向引物以及具有如SEQ IDNo.15所示核苷酸序列的探针。

本发明所述的引物探针组合物能够对副流感病毒4a型和4b型进行特异性分型，且检测灵敏度高，据检测，该引物探针组合物对副流感病毒4a型的最低检出限为4.8×10¹copies/μL，对副流感病毒4b型的最低检出限为5.2×10¹copies/μL，灵敏度高；同时该引物探针组合物能够特异性地对副流感病毒4a型和4b型进行分型，与副流感病毒1型、2型或3型均不存在交叉反应，特异性极强，能够快速、准确地对副流感病毒进行分型检测。

作为优选，上述的引物探针组合物还包括用于检测副流感病毒1型、2型和3型中至少一种的引物和探针。