[发明专利]一种与绵羊脂肪相关的miRNA及其应用

说明书

本发明涉及一种与绵羊脂肪相关的miRNA及其应用。本研究以多浪羊与小尾寒羊皮下脂肪组织为研究对象，使用RNA‑seq技术对基因进行测序分析并使用分子实验进行验证，发现一种与绵羊脂肪相关的新的miRNA。本发明为培育优质肉用绵羊等提供基础，具有很好的应用价值。

技术领域

本发明属于农业基因工程技术领域，具体涉及一种与绵羊脂肪相关的miRNA及其应用。

背景技术

miRNA是短链内源性非编码RNA，保守性高，在动物、植物以及病毒体内广泛分布。在许多生物过程中，miRNA会参与基因转录后的调控，通过与互补mRNA的3'UTR碱基配对从而阻碍mRNA翻译或者使mRNA降解。miRNA对脂肪细胞分化既有促进作用又有抑制作用。miR-143是第一个被发现在成脂分化过程中起到调控作用的miRNA，通过抑制MAP2K5表达进而促进成脂分化。miR-21在3T3-L1脂肪细胞分化进程里，扮演的角色可对前脂肪细胞分化起到明显促进作用，并增加脂联素的表达。在前脂肪细胞分化过程中LPL是miR-152的直接靶基因，miR-152可以抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖，通过负性调节LPL使3T3-L1前脂肪细胞的分化得到促进。

羊的品种不同，其脂肪沉积能力也有所差异。多浪羊与小尾寒羊同为我国优质地方绵羊品种，但是多浪羊相对于小尾寒羊来说脂肪沉积能力更强，属于肉脂兼用型绵羊，而小尾寒羊属于短瘦尾型绵羊，皮下脂肪较少，二者的差异为我们研究绵羊脂肪沉积提供了良好素材。

为探讨脂肪发育的分子机制，本研究以多浪羊与小尾寒羊皮下脂肪组织为研究对象，使用RNA-seq技术对基因进行测序分析，以期为培育优质肉用绵羊及预防治疗肥胖、脂代谢综合征等疾病提供基础。

发明内容

本发明的首要目的是提供一种与绵羊脂肪相关的miRNA，所述miRNA是经过测序及生信分析筛选并使用分子实验验证获得的。

一种与绵羊脂肪相关的miRNA，所述miRNA为NC_040278.1_37602，序列与SEQ IDNO.1具有90％以上序列同源性。

优选的，NC_040278.1_37602序列与SEQ ID NO.1具有95％以上序列同源性；更优选的，miRNA序列为SEQ ID NO.1。

优选的，脂肪为皮下脂肪或肌内脂肪。

一种与绵羊脂肪相关的pre-miRNA，所述preRNA序列与SEQ ID NO.2具有90％以上序列同源性；优选的，pre-miRNA序列为SEQ ID NO.2。

本发明的第二目的是提供一种检测与绵羊脂肪或肉用性能相关的试剂。

所述试剂通过测序技术、核酸杂交技术或核酸扩增技术检测样本中NC_040278.1_37602和/或其靶基因的表达水平。

优选的，所述NC_040278.1_37602的靶基因为TBC1D19、PDE3B、CLIC4、PSD3、VAV3、TASOR2、SPATA6、PTGS2基因中的一种或几种，更优选的，靶基因为PTGS2基因。

所述肉用性能是指产肉量、胴体组成、肉中脂肪含量、肉品等级、脂肪色泽、肌内脂肪含量等方面的性能。

优选的，脂肪为皮下脂肪或肌内脂肪。

本发明的第三目的是提供一种检测与绵羊脂肪或肉用性能相关的试剂盒。

所述试剂盒包含进行DNA微阵列、寡核苷酸微阵列、RNA印迹法、RNase保护试验和反转录聚合酶链反应所必需的DNA芯片、寡核苷酸芯片、探针或引物，以检测NC_040278.1_37602和/或其靶基因的表达水平。

优选的，该试剂盒包括QPCR实验中使用的反转录引物和/或扩增引物，所述反转录引物是Oligo(dT)特异性的RT引物。