[发明专利]一种抗肿瘤多肽Bax-BH3、荧光高分子纳米胶束及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种抗肿瘤多肽Bax-BH3，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.一种抗肿瘤药物，其特征在于，包括权利要求1所述的抗肿瘤多肽Bax-BH3和辅料。

3.一种荧光高分子纳米胶束，其特征在于，包括权利要求1所述的抗肿瘤多肽Bax-BH3和高分子载体；

所述高分子载体为嵌段共聚物精氨酰甘氨酰天冬氨酸-聚N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺-嵌段聚甲基丙烯酰罗丹明B-聚甲基丙烯酸甲酯RGD-PHPMA-b-Poly(MMA-alt-(Rhob-MA))；

所述的高分子载体的制备方法，包括以下步骤：

1)对罗丹明B进行还原，合成还原态的罗丹明B，用甲基丙烯酰氯对罗丹明B进行功能化修饰获得甲基丙烯基功能化罗丹明B Rhob-MA；

2)MMA、4-氰基戊酸二硫代苯甲酸CPADB、偶氮二异丁腈AIBN和Rhob-MA；以THF为反应溶剂，冻融脱气三次后N₂保护，70℃反应6h，反获得的产物石油醚沉淀，真空干燥得到纯化后产物聚甲基丙烯酰罗丹明B-聚甲基丙烯酸甲酯Poly(MMA-alt-(Rhob-MA))；

3)HPMA、AIBN、Poly(MMA-alt-(Rhob-MA))，以THF为反应溶剂，冻融脱气三次后N₂保护，70℃反应12h，反应后产物乙醚沉淀，真空干燥得到纯化后产物PHPMA-b-Poly(MMA-alt-(Rhob-MA))；

4)NHS、EDC和PHPMA-b-Poly(MMA-alt-(Rhob-MA))，以MES缓冲液为反应溶剂，20～25℃反应24h；反应产物干燥后加入THF过滤，收集滤液，得到纯化后的产物NHS-PHPMA-b-Poly(MMA-alt-(Rhob-MA))；

5)NHS-PHPMA-b-Poly(MMA-alt-(Rhob-MA))、精氨酰甘氨酰天冬氨酸RGDfK、以MES缓冲液为反应溶剂，20～25℃反应24h；反应产物透析纯化得到纯化后的产物溶液，将产物溶液冻干，得到纯化后的RGD-PHPMA-b-Poly(MMA-alt-(Rhob-MA))。

4.权利要求3所述的荧光高分子纳米胶束的制备方法，包括以下步骤：

1)将嵌段共聚物RGD-PHPMA-b-Poly(MMA-alt-(Rhob-MA))溶解于有机溶剂中获得嵌段共聚物溶液；

2)将所述嵌段共聚物溶液滴加至抗肿瘤多肽Bax-BH3的水溶液中获得荧光高分子纳米胶束。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述嵌段共聚物溶液的浓度为2～3mg/mL，所述有机溶剂为四氢呋喃。

6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述的抗肿瘤多肽Bax-BH3的水溶液的浓度为0.3～0.7mg/mL；步骤2)中所述滴加过程中对多肽溶液进行超声处理，每一滴所述嵌段共聚物溶液的体积为5～15μL。

7.权利要求1所述的抗肿瘤多肽Bax-BH3、权利要求2所述的抗肿瘤药物、权利要求3所述的荧光高分子纳米胶束、权利要求4～6任意一项所述制备方法制备获得的荧光高分子纳米胶束在制备预防和/或治疗因Bcl-2家族蛋白中抗凋亡蛋白表达异常导致的疾病的药物中的应用；

所述疾病为恶性肿瘤。