[发明专利]一种乳酸链球菌素的提取方法

说明书

本发明涉及生化分离工程技术领域，具体涉及一种乳酸链球菌素的提取方法。包括以下步骤：(1)将发酵完成的乳酸链球菌素发酵液进行PH预处理，获得预处理液；(2)通过使用陶瓷膜对预处理液进行过滤，获得陶瓷膜清液；(3)使用多效蒸发器对陶瓷膜清液进行浓缩，获得浓缩液；(4)将浓缩液置于溶析罐中，向其中加入氯化钠，获得盐析液；(5)向盐析液中加入正丁醇进行溶析，静置时间为24h以上后，依次将溶析液的溶媒层、乳化层和水层分别分出；(6)使用管式离心机对步骤(5)中分出的乳化层进行离心处理，获得乳酸链球菌素湿品。本申请有效的降低了有机溶媒的使用量和氯化钠的使用量，提高了产品的纯度、收率和劳动生产效率。

技术领域

本发明涉及生化分离工程技术领域，具体涉及一种乳酸链球菌素的提取方法。

背景技术

乳酸链球菌素是从乳酸乳球菌发酵产物中提取的一种多肽类抗菌物质，是一种世界公认的安全、天然生物食品防腐剂和抗菌剂。该抗菌物质鉴于其高度的安全性和优异的抗菌性能受到众多国家食品监管机构的认可，纷纷将其列入食品添加剂名录中。随着乳酸链球菌素可应用的食品种类也不断扩大，受到越来越多食品生产企业的青睐。

乳酸链球菌素从发现至今，研究者们相继开发了泡沫提取法、树脂提取法、溶媒提取法、菌体吸附法和盐析法等提取方法。泡沫提取法需要的设备简单，投入相对较低，但是存在提取效率低、获得产品的效价不高的缺点；树脂提取法虽然可以获得纯度较高的产品，但是其操作过程控制精度高，产生较多的固废等缺点；单纯的溶媒提取法虽然能获得较高效价产品，但是需要的溶媒量大，带来了很大的环境污染和安全风险；菌体吸附法需要不断的分离菌体，而且产品与菌体分离不彻底，影响了提取效率和收率，获得的产品纯度不高；盐析法由于使用大量的盐类(如硫酸铵、氯化钠等)，造成严重的环境污染，获得的产品纯度不高。

发明内容

针对现有技术的上述不足，本发明提供一种乳酸链球菌素的提取方法，通过优化乳酸链球菌素提取工艺的流程设计，不仅克服了泡沫提取法、单纯使用溶媒法、盐析法和树脂提取法的不足，而且有效的降低了有机溶媒的使用量和氯化钠的使用量，提高了产品的纯度、收率和劳动生产效率，达到了既提高产品质量和纯度，又保护了环境的目的。

本发明的技术方案如下：

一种乳酸链球菌素提取方法，包括以下步骤：

(1)将发酵完成的乳酸链球菌素发酵液进行PH预处理，获得预处理液；

(2)通过使用截留孔径为50nm-200nm的陶瓷膜对预处理液进行过滤，将过滤下来物质分离后，获得陶瓷膜清液；

(3)使用多效蒸发器对陶瓷膜清液进行浓缩，获得浓缩液；

(4)将浓缩液置于溶析罐中，向其中加入氯化钠，获得盐析液；

(5)向盐析液中加入正丁醇进行溶析，加入的正丁醇按照正丁醇：盐析液为 0.5:1或1:1或2:1或3:1(V/V)的比例加入，充分搅拌使其混合均匀，静置时间为24h以上后，依次将溶析液的溶媒层、乳化层和水层分别分出；

(6)使用管式离心机对步骤(5)中分出的乳化层进行离心处理，获得乳酸链球菌素湿品。即含水分较多的固体状态。

作为优选，所述步骤(1)中将发酵完成的效价为8000IU/mL-10000IU/mL 的乳酸链球菌素发酵液使用浓度为30-32(w/w)的食品级盐酸，将pH值调节至2.0-3.0，加热至60℃-80℃，维持20min-40min。

作为优选，所述步骤(3)中使用的多效蒸发器包括二效蒸发器或三效蒸发器或四效蒸发器或者是MVR蒸发器，多效蒸发器使用的浓缩温度为60℃-80℃，浓缩倍数为3-5倍。为保证产品的稳定性，防止浓缩液中的物质发生变性和析出，选择合适的浓缩温度和浓缩倍数。