[发明专利]一种数字PCR装置、制备方法、设备及介质在审
申请号: | 202110827162.2 | 申请日: | 2021-07-21 |
公开(公告)号: | CN113652342A | 公开(公告)日: | 2021-11-16 |
发明(设计)人: | 吴文明;龚尧;邹丽丽;伊翔;王康宁;姜杨阳 | 申请(专利权)人: | 广东省科学院健康医学研究所 |
主分类号: | C12M1/34 | 分类号: | C12M1/34;C12M1/02;C12M1/38;C12M1/00;B01L3/00;B01L7/00 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 郑宏谋 |
地址: | 510500 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 数字 pcr 装置 制备 方法 设备 介质 | ||
1.一种数字PCR装置,其特征在于,包括注射模块、连接管道、光刻液滴芯片、热拉伸毛细管、恒温热源、导温模块、检验镜头和废液容器,所述液滴生成模块的输出端连接所述连接管道的输入端,所述连接管道的输出端连接所述光刻液滴芯片的输入端,所述光刻液滴芯片的输出端连接热拉伸毛细管的输入端,所述热拉伸毛细管缠绕在所述导温模块的表面,所述导温模块放置在所述恒温热源上,所述热拉伸毛细管的输出端连接所述废液容器的输入端,所述检验镜头对准所述热拉伸毛细管的输出端;
其中,所述注射模块,用于注射水相和油相进入所述连接管道;
所述连接管道,用于传输所述水相和所述油相至所述光刻液滴芯片;
所述光刻液滴芯片,用于通过光刻法制备的微流道根据所述水相和所述油相制备液滴;
所述恒温热源,用于为所述导温模块提供温度;
所述导温模块,用于根据所述恒温热源在表面形成不同的温度区;
所述热拉伸毛细管,用于引导液滴在所述导温模块表面不同的温度区流动进行高低温循环处理,完成PCR扩增;
所述检验镜头,用于对PCR扩增后的液滴进行荧光检测;
所述废液容器,用于收集废弃的油相和液滴。
2.根据权利要求1所述的一种数字PCR装置,其特征在于,所述注射模块包括步进电机、多注射同步推板、水相注射器、油相注射器和固定挡板,其中,所述多注射器同步推板的一端连接所述步进电机,另一端连接所述水相注射器和所述油相注射器,所述水相注射器和所述油相注射器平行放置,所述水相注射器和所述油相注射器的另一端与所述固定挡板连接。
3.根据权利要求1所述的一种数字PCR装置,其特征在于,所述光刻液滴芯片通过光刻法制备的微流道,根据所述水相和所述油相制备得到直径为0.12mm液滴。
4.根据权利要求1所述的一种数字PCR装置,其特征在于,所述导温模块包括但不限于PDMS模块,所述PDMS模块的高度为11mm,当所述恒温热源的温度为95℃时,所述PDMS模块的下表面温度为95℃,上表面温度为65℃。
5.一种数字PCR装置的制备方法,其特征在于,包括:
将水相注射器和油相注射器平行放置,通过多注射器同步推板和固定挡板固定所述水相注射器和所述油相注射器,并将步进电机与多注射器同步推板连接,得到注射模块;
通过光刻法制备得到光刻液滴芯片;
通过热拉伸成型技术对聚合物毛细管进行拉伸得到热拉伸毛细管;
将所述热拉伸毛细管缠绕在导温模块的表面,并将所述导温模块放置在恒温热源上;
通过连接管道连接所述光刻滴液芯片和所述注射模块,通过所述热拉伸毛细管连接所述光刻液滴芯片和废液容器,并将检测镜头对准热拉伸毛细管的输出端,完成对数字PCR装置的制备。
6.根据权利要求5所述的一种数字PCR装置的制备方法,其特征在于,所述通过光刻法制备得到光刻液滴芯片,包括:
获取可形成液滴的微流道图案;
根据所述图案将光刻胶涂在硅片上,制备得到微流道为0.1mm的硅基微流道模具;
将聚二甲基硅氧烷预聚物与固化剂按第一比例的质量进行混合,搅拌均匀后抽出空气并浇铸在所述硅基微流道模具上,在烘箱中烤制后完成倒模,得到微流道模型;
通过等离子清洗机对所述微流道模型和玻璃进行表面处理,将所述微流道模型和所述玻璃贴在一起并通过烘箱进行烤制,完成对光刻液滴芯片的制备。
7.根据权利要求5所述的一种数字PCR装置的制备方法,其特征在于,所述通过热拉伸成型技术对聚合物毛细管进行拉伸得到热拉伸毛细管,包括:
对聚合物毛细管进行加热处理,待温度稳定后拉伸得到内径小于液滴直径的热拉伸毛细管,其中,所述聚合物毛细管包括但不限定于铁氟龙毛细管。
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