[发明专利]一种精准可视化原位构建干细胞凝胶的方法及配套诊疗系统

权利要求书

1.一种精准可视化原位构建干细胞凝胶的配套诊疗系统，其特征在于：包括微量注射泵、诊疗套管针和安装于微量注射泵上的注射器；

诊疗套管针包括外套管针和输液接头，输液接头通过输液管与注射器连通，诊疗套管针上设置有光缆，光缆上设置有与诊疗套管针可拆卸连接的光纤座和与外套管针滑动配合的光缆杆；当启动微量注射泵时，凝胶溶液经注射器、输液管、输液接头到达诊疗套管针；

光缆连接有分光器，分光器连接有摄像装置、白光光源装置和固化光源装置，摄像装置电连接有显示器，外套管针包括针柄，针柄上设置有接口I和接口II，针柄上固定有与接口I和接口II连通的针体，外套管针的接口I连通有输液接头，外套管针的接口II上可拆卸连接有光纤座，光纤座上固定有光缆和光缆杆，光缆杆位于针体内并且从针头延伸出，光缆杆包括保护套管，保护套管内包裹有图像导光束、白光导光束和固化导光束，诊疗套管针上可拆卸连接有穿刺针，穿刺针的针管部分与外套管针的针管部分相抵。

2.根据权利要求1所述的精准可视化原位构建干细胞凝胶的配套诊疗系统，其特征在于：还包括内套管针，内套管针与外套管针可拆卸连接，内套管针的针管部分位于外套管针的针管部分内，内套管针的针管部分与外套管针的针管部分之间构成间隙。

3.根据权利要求1所述的精准可视化原位构建干细胞凝胶的配套诊疗系统，其特征在于，构建干细胞凝胶的方法，包括如下步骤：

S1：配置PRP/GelMA溶液；

S2：将配置好的PRP/GelMA溶液抽取至注射器内，将注射器固定在微量注射泵固定架上，通过设置按钮设置微量注射泵上注射器的注射速度；

S3：使用诊疗套管针和穿刺针，穿刺到组织一侧内部，取出穿刺针后，在诊疗套管针上连接光纤座，并在诊疗套管针上连接输液接头且与注射器连通，开启白光光源装置和摄像装置，且显示器上显示摄像装置采集的图像；

S4：通过显示器上的图像便能找到组织受损区域，再将修复套管的针头部置于组织缺损部位，通过脚踏开关控制启动微量注射泵同时启动固化光源装置，使得注射器按照设置好的注射速度向诊疗套管针注入PRP/GelMA溶液，同时接受固化光源照射；PRP/GelMA溶液逐步填充受损组织并同步固化，直至PRP/GelMA溶液固化成凝胶支架，完全填充缺损部位并牢固粘附在组织缺损部位。

4.根据权利要求3所述的精准可视化原位构建干细胞凝胶的配套诊疗系统，其特征在于，构建干细胞凝胶的方法，包括如下步骤：配置PRP/GelMA溶液，包括如下步骤：

(1)配置0.5％(w/v)光引发剂LAP溶液：

S11：在电子天平上称量0.05g的LAP，装入棕色瓶中；

S12：取10mlPBS液，加入装有0.05g的光引发剂的棕色瓶中备用；

S13：以40～50℃水浴加热溶解15分钟，期间振荡数次；

(2)配置浓度为5％(w/v)GelMA溶液：

S11：准备两管洁净离心管，分别标记为A与B，均用锡箔纸包裹；

S12：在电子天平上分别称量0.25g GelMA明胶放入A与B离心管中；

S13：用移液枪分别取2.5ml已配好的0.5％(w/v)光引发剂溶液与2.5mlPBS溶液，加入A离心管中，振荡使GelMA明胶充分浸润；

S14：把A离心管以60～70℃水浴避光加热溶解20～30分钟，期间振荡数次；

S15：溶解后将GelMA溶液立即用0.22微米除菌过滤纸除菌，避光保存,备用；

S17：用移液枪分别取2.5ml已配好的0.5％(w/v)光引发剂溶液加入B离心管中，振荡使GelMA明胶充分浸润；

S18：把B离心管以60～70℃水浴避光加热溶解20～30分钟，期间振荡数次，溶解后将GelMA溶液立即用0.22微米除菌过滤纸除菌；

S19：B离心管中加入无菌兔的PRP2.5ml和A离心管中的PBS溶液,充分混匀,成PRP/GelMA溶液，避光保存，备用。

5.根据权利要求3所述的精准可视化原位构建干细胞凝胶的配套诊疗系统，其特征在于，构建干细胞凝胶的方法，包括如下步骤：

制备NB修饰的HA溶液：

4-(4-(羟甲基)-2-甲氧基-5-硝基苯氧基)丁酸甲酯和乙二胺溶解在甲醇溶液,反应完成后，溶剂在真空条件下蒸发，粗沉淀在甲醇中溶解，用乙酸乙酯重新沉淀三次，滤饼在30℃真空干燥12h，直至出现淡黄色粉末，将透明质酸溶于50ml去离子水中，室温下加入NB，然后加入sigma-aldrich，将混合溶液的ph值调整为4.5，然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二胺盐酸盐，室温搅拌48h，溶液装入分子量3500的透析管中，在含0.1M的NaCl的HCl(ph3.5)稀释液中透析2天，再在去离子水中透析2天，用冷冻干燥法得到HA-NB粉末状溶液，

配置强粘附力凝胶：

按10％GelMA,2.5％HA-NB,0.2％LAP的含量，将HA-NB粉末状溶液加入至PRP/GelMA溶液中。