[发明专利]胞外多聚物鞘氨醇单胞菌以及在制备高凝胶强度三赞胶中的应用

权利要求书

1.胞外多聚物鞘氨醇单胞菌,其特征在于该菌种的拉丁文名称为SphingomonasSanxanigenens，其保藏编号为CGMCC No.20172。

2.根据权利要求1所述的胞外多聚物鞘氨醇单胞菌在发酵制备高凝胶强度三赞胶中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于发酵在高通风量的条件下进行，所述的通风量为800m³/h～3200m³/h。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于发酵后采用碱性蛋白酶对发酵液进行预处理后提取制备高凝胶强度三赞胶，碱性蛋白酶处理的条件是加入占发酵液体积0.08％～0.2％、酶活为20～50u/g的碱性蛋白酶并保温2～6小时。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于将碱性蛋白酶预处理后的发酵液在pH＝4.5～5.5的条件下保温80℃～95℃后提取制备高凝胶强度三赞胶。

6.根据权利要求2～5中任一项所述的应用，其特征在于包括如下工艺步骤：

A、将生产菌种接种到灭菌后且含有碳源、氮源及必要营养物质的发酵培养基中；生产菌种选用拉丁文名称为Sphingomonas Sanxanigenens、保藏编号为CGMCC No.20172的胞外多聚物鞘氨醇单胞菌；

B、在温度28℃～32℃，pH＝6.5～7.5的条件下，进行通气发酵；

C、当发酵液粘度不再增长时发酵结束；

D、对步骤C中制备的发酵液调整pH＝9.5～11，加入碱性蛋白酶进行保温处理，碱性蛋白酶处理的条件是加入占发酵液体积0.08％～0.2％、酶活为20～50u/g的碱性蛋白酶并保温2～6小时；调pH＝4.5～5.5并升温处理，经后提取制成高凝胶强度的三赞胶；

步骤B中通气发酵的条件如下：

0～20小时：风量800m³/h～1800m³/h；

21～50小时：风量1800m³/h～2400m³/h；

51小时～放罐：风量2500m³/h～3200m³/h。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于所述的步骤A、B中发酵培养基由如下质量百分含量的原料组成：

蔗糖或葡萄糖3％～5％；蛋白胨0.1％～0.3％；牛肉膏0.1％～0.15％；大豆浓缩蛋白0.1％～0.3％；磷酸二氢钾0.1％～0.2％；磷酸氢二钾0.1％～0.2％；硝酸钾0.15％～0.3％；硫酸镁0.015％～0.025％；硫酸锰0.001％～0.003％；氯化钠0.0008％～0.0012％；消泡剂0.03％～0.05％；余量为无菌水；pH＝7.5～8.0。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于步骤B中pH的调整采用质量百分比浓度10％～30％的碱性溶液，碱性溶液的溶质选用可溶性碱、可溶性强碱弱酸盐中的一种或其结合。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于所述的步骤A中将拉丁文名称为Sphingomonas Sanxanigenens、保藏编号为CGMCC No.20172的胞外多聚物鞘氨醇单胞菌经过扩大培养后，按照种子液：发酵培养基＝8％～12％的接种量将种子液接种于灭菌后的发酵培养基中。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于所述的扩大培养包括：

(1)将拉丁文名称为Sphingomonas Sanxanigenens、保藏编号为CGMCCNo.20172的胞外多聚物鞘氨醇单胞菌接种于摇瓶种子培养基制成摇瓶种子；

(2)将摇瓶种子经扩大培养后制成种子液；

(3)按种子液：发酵培养基＝8％～12％的接种量，将制成的种子液接入发酵罐内灭菌后的发酵培养基中进行发酵。