[发明专利]一种生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒，其特征在于：所述Simoa试剂盒包括捕获抗体包被的磁珠、FOLR1标准品、生物素化的检测抗体、链霉亲合素-β-半乳糖苷酶(SBG)溶液、荧光底物溶液和样本稀释液。

2.根据权利要求1所述的生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒，其特征在于，所述捕获抗体包被的磁珠的制备方法为：

(1)将捕获抗体通过超滤管进行换液处理；

(2)将2.5-2.9μm磁珠用EDC进行活化；

(3)于2-8℃条件下，将步骤(1)处理的捕获抗体与步骤(2)活化的磁珠混合孵育2-3h；

(4)经步骤(3)孵育的产物用PBST溶液洗两次后，用封闭液于37℃封闭，最后用磁珠稀释液洗两次，即获得捕获抗体包被的磁珠，于磁珠稀释液中储存。

3.根据权利要求2所述的生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒，其特征在于：所述步骤(1)中捕获抗体为单克隆抗体K5646；超滤使用的缓冲液是为50-60mmol/L吗啉乙磺酸缓冲液，pH＝6.0-6.4。

4.根据权利要求2所述的生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒，其特征在于：所述步骤(3)中捕获抗体的反应浓度为0.1-0.2mg/mL；活化的磁珠的反应浓度为0.5-2.1×10⁹/mL。

5.根据权利要求2所述的生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒，其特征在于：所述步骤(4)中PBST溶液为10-12mmol/L PBS+1-1.5％Tween 20，pH＝7.4-7.9；封闭液为10-16mmol/LPBS+1-1.2％BSA，pH＝7.4-8.2；磁珠稀释液为50-60mmol/L Tris-HCl+10-13mmol/L EDTA+0.1-0.3％Tween20+1-1.9％BSA，pH＝7.4-9.0。

6.根据权利要求1所述的生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒，其特征在于，所述生物素化的检测抗体的制备方法为：将检测抗体用PBS溶液通过超滤管进行换液处理，于室温下加入NHS-Biotin或其衍生物，反应30-45min，超滤纯化后获得生物素化的检测抗体，其中检测抗体为单克隆抗体K56461。

7.根据权利要求6所述的生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒，其特征在于：所述检测抗体与NHS-Biotin或其衍生物的反应物质的量比为1:30-1:50；PBS溶液为10-30mmol/L磷酸盐缓冲液，pH＝7.4-9.0。

8.根据权利要求1所述的生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒，其特征在于：酶和底物溶液的配制：所述SBG溶液浓度为50-400pmol/L，SBG缓冲液为10-13mmol/L PBS+0.5％BSA+1-2mmol/L MgCl₂，pH＝7.4-8；荧光底物为试卤灵-β-半乳糖苷，荧光底物溶液的浓度为100-120μmol/L。

9.权利要求1-8任一项所述生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒在制备癌症诊断试剂中的使用方法。

10.权利要求1-8任一项所述生物标志物FOLR1的Simoa试剂盒在检测人体液中FOLR1含量中的使用方法。