[发明专利]毡毛青霉DZ-9-67及其在杜仲叶总黄酮提取中的应用

权利要求书

1.毡毛青霉(Penicillium velutinum)DZ-9-67，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号：GDMCC No:61728，保藏日期2021年6月21日，地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；邮编510070。

2.一种权利要求1所述毡毛青霉DZ-9-67在杜仲叶总黄酮提取中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述应用的方法为：杜仲叶粉中加入无菌蔗糖水溶液，接种毡毛青霉DZ-9-67孢子，于28–30℃发酵2–3d，发酵物加入乙醇水溶液中浸提后再进行超声提取，抽滤，滤液浓缩后，获得浓缩物，真空干燥，获得杜仲叶总黄酮粗提物。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的无菌蔗糖水溶液浓度为3–5g/L，无菌蔗糖水溶液体积用量以杜仲叶粉重量计为1.0–1.5mL/g，所述毡毛青霉DZ-9-67孢子接种量以杜仲叶粉重量计为5×10⁷–7×10⁷个/g。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述杜仲叶粉是将成熟的绿色杜仲叶烘干粉碎后过20目筛获得。

6.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述乙醇水溶液体积浓度50％–70％，所述乙醇水溶液用量以发酵前杜仲叶粉重量计为15–25mL/g。

7.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述超声提取是在50℃的超声波清洗机中，200–300W超声提取30–60min。

8.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述毡毛青霉DZ-9-67孢子以孢子液的形式加入，所述孢子液的制备方法为：低温保藏的毡毛青霉DZ-9-67接种于PDA平板培养基，于28–30℃恒温培养1.5–2d后，加入无菌生理盐水于培养皿中，用接种环搅动使孢子悬浮，获得孢子液；所述的PDA平板培养基终浓度组成为：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，琼脂20g/L，溶剂为自来水，pH自然。

9.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述浓缩物的制备方法为：发酵物加入体积浓度50％–70％乙醇水溶液中，搅拌均匀后置于60–70℃水浴中浸提2–4h，然后转入50℃的超声波清洗机中，200–300W超声提取30–60min；超声醇提结束后，趁热抽滤，将滤液45℃减压浓缩至原体积的1/15–1/25，获得浓缩物；所述乙醇水溶液用量以发酵前杜仲叶粉重量计为15–25mL/g。

10.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述真空干燥为：50℃、0.1MPa条件下真空干燥至恒重。