[发明专利]一种稳定生物基质中卡比多巴/左旋多巴的方法

说明书

本发明公开了一种稳定生物基质中卡比多巴/左旋多巴的方法，在生物基质中加入稳定剂，所述稳定剂中包括体积分数5%的酸化试剂和质量分数10%的抗氧化剂。本发明基于调节pH值和添加抗氧化剂，达到保护生物基质中CD/LD的目的，最终使含有CD/LD的生物基质样品能够在多种环境中储存。使用本发明，能够使含有CD/LD的全血样品在2‑8℃条件下保存2小时，血浆样品在2‑8℃条件下保存20小时，在低于‑60℃条件下保存30天，能够经历4次冻融循环。满足了CD/LD临床前/临床试验中样品的收集、运输、储存与检测需求，为CD/LD的药代动力学研究提供基础。

技术领域

本发明涉及一种稳定生物基质中卡比多巴/左旋多巴的方法，尤其涉及一种满足卡比多巴/左旋多巴临床前/临床试验中样品的收集、运输、储存和检测需求的方法，属于生物技术领域。

背景技术

左旋多巴(Levodopa，LD)是治疗帕金森病(Parkinson’s disease，PD)的最有效药物，它是多巴胺(Dopamine，DA)的前体药物。它可以通过血脑屏障，并在脑内被多巴脱羧酶(Dopa decarboxylase，DDC)脱羧转化成DA而发挥作用。由于DDC不仅存在于脑中，在其他脏器和血管壁细胞内也广泛存在，如单用LD，仅约1％药物能进入中枢，故临床上多采用LD合并外周多巴脱羧酶抑制剂(Dopadecarboxylase inhibitor，DDCI)如卡比多巴(Carbidopa，CD)或苄丝肼(Benserazide，BSZ)制成复方制剂，以此提高LD进入中枢的量。

卡比多巴(Carbidopa，CD)是外周脱羧酶抑制剂(DDCI)，由于其不透过血脑屏障可抑制外周组织中左旋多巴脱羧，提高进入中枢的左旋多巴含量，从而使低剂量的左旋多巴产生有效的多巴血药浓度，并降低外周的副作用。卡比多巴可单用，也可与左旋多巴联用，两者合用能使左旋多巴达到治疗作用所需的剂量减少75％，减少由进入外周组织所带来的呕吐、不自主运动等副作用。

在临床前和临床研究中，药代动力学研究是一种直观反映生物体内吸收、分布、代谢和排泄规律的科学。前期的资料反映，CD/LD在全血、血浆等生物基质中均存在稳定性问题，如果不能解决，实验中的检测数据就无法真实反映药物在体内的情况。关于CD/LD药代动力学研究也就无从谈起。为了推动CD/LD临床前和临床研究，需要有一种方法保证生物基质中的CD/LD在收集、运输、储存和检测处于稳定状态。

发明内容

本发明的目的旨在提出一种稳定生物基质中卡比多巴/左旋多巴的方法，以此解决卡比多巴/左旋多巴临床前/临床试验中样品收集、运输、储存和检测时的稳定性需求，该方法操作简单快速，操作性强。

为实现上述目的，本发明提供一种稳定生物基质中卡比多巴/左旋多巴的方法，在生物基质中加入稳定剂，所述稳定剂中包括体积分数5％的酸化试剂和质量分数10％的抗氧化剂。

优选地，所述稳定剂中包括体积分数5％的三氟乙酸和质量分数10％的焦亚硫酸钠。

优选地，所述生物基质包括血浆、全血、排泄物、组织匀浆液中的一种。

优选地，所述稳定剂与全血的体积比为5:95。

优选地，所述稳定剂与血浆的体积比为2.5:97.5。

优选地，所述稳定剂的配制方法为：称取焦亚硫酸钠，加入灭菌注射用水完全溶解，再加入三氟乙酸，混匀，获得稳定剂。

优选地，具体包括：在预冷的EDTA·K₂抗凝管中添加50μL稳定剂，再加入0.95mL全血，混匀，置于冰上；全血样品2-8℃条件下，3000g离心10min；离心后血浆于-60℃以下保存。

优选地，具体包括：在预冷的EP管中添加25μL稳定剂，再加入0.975mL血浆，混匀后-60℃以下保存。

本发明所达到的有益效果：