[发明专利]成人still’s病生物标志物、诊断试剂及其应用

说明书

本发明公开了成人still’s病(Adult Onset Still’s Disease,AOSD)的DNA甲基化标记物、诊断试剂及其应用。包括6个甲基化位点：chr11:114167495、chr1:198568084、chr6:35654359、chr6:35654363、chr13:113327910、chr6:139794538的一个或多个。本发明首次利用特定的DNA甲基化位点作为分子标记对成人still病患者与健康人、类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)、脓毒血症(Sepsis)、药疹(DrugEruption)、T细胞淋巴瘤(TcellLymphoma)患者进行辅助筛查，为该领域的诊断开辟了新的途径和方式，所需要的血标本少，方便易开展，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于医药分子生物学检测技术领域，具体涉及成人still’s病的诊断标志物、诊断试剂及其应用。

技术背景

成人still’s病(Adult Onset Still’s Disease，AOSD)是一种罕见的累及全身多系统的临床综合征。目前这种疾病病因尚不明确，其发病机制复杂，常认为受到感染、遗传及免疫等因素的影响。由于成人still’s病发病率较低，并且缺乏特异性临床特征以及实验室检查指标，临床诊断之前必须首先排除感染、肿瘤、结缔组织病等疾病，因此现阶段该疾病的诊断对于临床医生来说仍是一个巨大的挑战。而且排除诊断的过程漫长，检查项目繁多，其中包括一些有创检查，给患者的心理、生理、经济带来沉重的负担。人们一直在寻找一个高度特异性的标志物能够快速、准确且伤害性低地对成人still’s病进行诊断。

表观遗传学标志物是外周血、其他体液或组织中的表观遗传学分子，它可以反映疾病的发生与发展，并且具有非入侵性、易于检测、能够反映疾病活动性和药物治疗能力的特点，特异性的表观遗传学修饰可以作为疾病的新型生物标志物。

目前，临床上尚无满意的高灵敏度高特异度的AOSD诊断标志，IL-18虽然报导较多，但其作为细胞因子并非AOSD所特有的；铁蛋白结合糖基化铁蛋白一起分析虽可提高灵敏度和特异度，但其也并非AOSD特有且难以开展；其他研究报导的AOSD生物标志物如sCD163、AGEs与sRAGE、S100 A8/A9和A12、CXCL10、CXCL13等缺乏多机构的共同验证。为此，AOSD患者常需要结合其他辅助项目包括骨髓穿刺等侵入性检查和PET-CT等较昂贵的检查，使该疾病的诊疗成本大大增加，加重了患者的心理、生理以及经济负担。因此，开发出新的具有高灵敏度和高特异度的AOSD诊断标志物是必要的，对提高AOSD的诊疗水平具有重要意义。

发明内容

本发明发现了用于AOSD早期诊断的生物标记物，这些生物标记物包含位于不同DNA片段的6个CpG位点(甲基化位点)，通过检测6个CpG位点的甲基化水平，分析单位点甲基化水平或联合Logistic二元回归和ROC曲线分析，可以辅助早期诊断AOSD，同时还能区分类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis，RA)、脓毒血症(Sepsis,SP)、药疹(DrugEruption,DE)和T细胞淋巴瘤(Tcell Lymphoma,TL)。

本发明的首要目的在于提供检测6个甲基化位点中的一个或多个的甲基化水平的产品在制备辅助诊断成人still’s病制剂中的应用。

所述的6个甲基化位点为：chr11:114167495、chr1:198568084、chr6:35654359、chr6:35654363、chr13:113327910、chr6:139794538。

具体的，成人still’s病患者chr11:114167495、chr6:35654359、chr6:35654363、chr6:139794538位点甲基化水平与健康对照组相比降低，chr1:198568084、chr13:113327910位点甲基化水平与健康对照组相比升高。