[发明专利]一种催化活性提高的羧酸还原酶突变体及其编码基因、基因工程菌以及应用

权利要求书

1. 一种催化活性提高的羧酸还原酶突变体，其特征在于，所述羧酸还原酶突变体为以SEQ ID NO.1所示野生型羧酸还原酶MsCAR的第505位氨基酸残基发生如下突变后所得突变体的一种：

第505位的精氨酸R突变为谷氨酸E的羧酸还原酶突变体R505E，氨基酸序列如SEQ IDNO.2；

第505位的精氨酸R突变为异亮氨酸I的羧酸还原酶突变体R505I，氨基酸序列如SEQ IDNO.3；

第505位的精氨酸R突变为甲硫氨酸M的羧酸还原酶突变体R505M，氨基酸序列如SEQ IDNO.4；

第505位的精氨酸R突变为谷氨酰胺Q的羧酸还原酶突变体R505Q，氨基酸序列如SEQ IDNO.5。

2. 一种催化活性提高的羧酸还原酶突变体，其特征在于，所述羧酸还原酶突变体为以SEQ ID NO.1所示野生型羧酸还原酶MsCAR的第506位氨基酸残基发生如下突变后所得突变体：

第506位的天冬酰胺N突变为赖氨酸K的羧酸还原酶突变体N506K，氨基酸序列如SEQ IDNO.6。

3. 一种催化活性提高的羧酸还原酶突变体，其特征在于，所述羧酸还原酶突变体为以SEQ ID NO.1所示野生型羧酸还原酶MsCAR的第505位氨基酸残基和第506位氨基酸残基发生如下突变后所得突变体的一种：

第505位的精氨酸R突变为异亮氨酸I，第506位的天门冬酰胺N突变为赖氨酸K的羧酸还原酶突变体R505I/N506K，氨基酸序列如SEQ ID NO.7；

第505位的精氨酸R突变为谷氨酸F，第506位的天门冬酰胺N突变为甘氨酸G的羧酸还原酶突变体R505F/N506G，氨基酸序列如SEQ ID NO.8；

第505位的精氨酸R突变为谷氨酸F，第506位的天门冬酰胺N突变为丙氨酸A的羧酸还原酶突变体R505F/N506A，氨基酸序列如SEQ ID NO.9；

第505位的精氨酸R突变为谷氨酸F，第506位的天门冬酰胺N突变为半胱氨酸C的羧酸还原酶突变体R505F/N506C，氨基酸序列如SEQ ID NO.10；

第505位的精氨酸R突变为谷氨酸F，第506位的天门冬酰胺N突变为缬氨酸V的羧酸还原酶突变体R505F/N506V，氨基酸序列如SEQ ID NO.11；

第505位的精氨酸R突变为异亮氨酸I，第506位的天门冬酰胺N突变为精氨酸R的羧酸还原酶突变体R505I/N506R，氨基酸序列如SEQ ID NO.12；

第505位的精氨酸R突变为赖氨酸K，第506位的天门冬酰胺N突变为甲硫氨酸M的羧酸还原酶突变体R505K/N506M，氨基酸序列如SEQ ID NO.13；

第505位的精氨酸R突变为苏氨酸T，第506位的天门冬酰胺N突变为丝氨酸S的羧酸还原酶突变体R505T/N506S，氨基酸序列如SEQ ID NO.14；

第505位的精氨酸R突变为酪氨酸Y，第506位的天门冬酰胺N突变为谷氨酸E的羧酸还原酶突变体R505Y/N506E，氨基酸序列如SEQ ID NO.15。

4.一种如权利要求1、2和3中任意一项所述的羧酸还原酶突变体的编码基因。

5. 根据权利要求4所述的羧酸还原酶突变体的编码基因，其特征在于，羧酸还原酶突变体R505I的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示。

6. 根据权利要求4所述的羧酸还原酶突变体的编码基因，其特征在于，羧酸还原酶突变体N506K的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示。

7. 根据权利要求4所述的羧酸还原酶突变体的编码基因，其特征在于，羧酸还原酶突变体R505F/N506G的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示。

8.一种包含权利要求4所述的羧酸还原酶突变体的编码基因的基因工程菌。