[发明专利]一种S1F-AXL复合物、试剂盒和检测该复合物的方法及应用在审
申请号: | 202110853708.1 | 申请日: | 2021-07-28 |
公开(公告)号: | CN113341145A | 公开(公告)日: | 2021-09-03 |
发明(设计)人: | 黄若磐;唐浩;罗树红;方建民;张双喆;朱思为 | 申请(专利权)人: | 瑞博奥(广州)生物科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/543 |
代理公司: | 广州华享智信知识产权代理事务所(普通合伙) 44576 | 代理人: | 代春兰 |
地址: | 510000 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 s1f axl 复合物 试剂盒 检测 方法 应用 | ||
1.一种检测S1F-AXL复合物的试剂盒,其特征在于,包含S1F(刺突蛋白)多肽和AXL(酪氨酸蛋白激酶受体)多肽,以S1F多肽、AXL多肽中的一种作为包被底物;所述S1F多肽和所述AXL多肽中至少一种为具有缀合标签的糖基化多肽,还包括具有微孔的微量滴定板、标记底物标记的抗标签特异性抗体、HRP偶联的二抗、洗涤缓冲液、标记底物反应液、反应终止液。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述S1F多肽为哺乳动物细胞表达系统表达的重组糖基化S1F多肽,具有或包含氨基酸序列SEQIDNO:1。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述AXL多肽为具有或者包含氨基酸序列为SEQIDNO:2或SEQIDNO:3的多肽片段。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述缀合标签为具有Fc区的IgG,所述Fc区具有氨基酸序列SEQIDNO:4。
5.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述标记底物为辣根过氧化物酶;所述标记底物反应液为含有3,3’,5,5’-四甲基联苯胺的缓冲液;所述反应终止液为0.2M硫酸。
6.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,还包括用于抑制S1F多肽和AXL多肽结合成复合物的抑制剂和测定稀释剂。
7.一种冠状病毒抑制剂的筛选方法,其特征在于,包括
步骤1:将冠状病毒的S1F多肽和AXL多肽中的一种多肽用测定稀释液稀释后用于包被微量滴定板,另一种多肽用于添加到微量滴定板的微孔中以形成S1F-AXL复合物;
步骤2:用洗涤缓冲液洗涤未结合多肽的微孔,然后将微孔进行温育;
步骤3:用标记底物标记抗标签特异性抗体,将被标记的抗标签特异性抗体递送到孔中;
步骤4:将孔温育预设时间以允许抗标签特异性抗体递送至与步骤一种形成的复合物结合;
步骤5:检测与固定在微量滴定板上的复合物结合的抗标签特异性抗体上的标记的信号特征,从而检测出S1F多肽与AXL多肽的复合物;
步骤6:将可疑S1F-AXL结合抑制剂添加到微量滴定板的微孔中,然后重复上述步骤1-步骤5,检测存在可疑S1F-AXL结合抑制剂时标记的信号特征,并与步骤5的信号强度进行对比,信号强度降低的程度表示可疑S1F-AXL结合抑制剂对S1F-AXL结合的抑制程度。
8.根据权利要求7所述的筛选方法,其特征在于,所述可疑S1F-AXL结合抑制剂为小分子、抗体或多肽中的一种或两种以上。
9.一种如权利要求1-6所述的试剂盒在筛选抑制冠状病毒的药物和疫苗中的应用。
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