[发明专利]酯酶突变体及其应用

说明书

本发明提供了一种酯酶突变体及其应用。通过在SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列基础上经过理性设计和几轮酶进化筛选得到的酯酶突变体，相比野生型酯酶发生了蛋白质结构和功能的改变，在实际应用时，酯酶突变体的催化活性和/或立体选择性得到了极大的提高，且当体系中含有某些有机助溶剂时，仍具有相对稳定的催化活性和/或立体选择性。另外，酯酶突变体催化活性和/或立体选择性的提高，在一定程度上降低了酶的用量，降低了后处理的难度，适合工业化生产。

技术领域

本发明涉及工业酶制备领域，具体而言，涉及一种酯酶突变体及其应用。

背景技术

在医药、农药及精细化工工业的发展过程中，有机合成面临着越来越大的挑战，在药物分子中，往往只有一个立体异构体有治疗作用，另外的立体异构体则没有治疗作用或甚至有副作用。在传统的有机合成中通常引入保护和去保护步骤来弥补反应的化学和区域选择性的不足，而生物酶催化反应通常具有较高催化活性和/或立体选择性，通常在中性和室温的条件下进行，环境污染少，因此，生物酶催化技术在有机合成方面的应用具有非常重大的实际应用价值。

酯酶是一种水解酶，是催化酯水解的酶总称，广泛存在于植物、动物和微生物中。动物胰脏酯酶和微生物酯酶是主要来源，主要是真菌，其次是细菌，不同来源的酯酶具有不同的催化特点和催化活力。酯酶已经实现商品化，在食品，医药，化工等领域起着重要作用。

CN 107058362 A中公开了酯酶基因est816及其重组酯酶，在大肠杆菌表达体系和毕赤酵母表达体系中具有高效可溶性表达，并且重组酯酶对拟除虫菊酯类农药（包括氯氟氰菊酯，氯氰菊酯，氰戊菊酯和溴氰菊酯）具有强降解作用，降解率高达90%以上，在拟除虫菊酯类农药残留方面有广阔的应用前景。CN 106929493 A中公开了一种内酯酶，其氨基酸序列系为将编号5的序列的第167的氨基酸有缬氨酸突变为组氨酸，提高了对α-玉米赤霉烯醇的降解效率。

生物催化剂在有机合成中应用时，多数情况下是非天然底物，而对于非天然底物时，它们的反应活性、稳定性和选择性常常不太好，因此能够真正被广泛应用的酯酶并不多。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种酯酶突变体及其应用，以解决现有技术中的酯酶活性低和/或立体选择性低的问题。