[发明专利]基于交叉网状银纳米线AgNW检测海洋毒素GYM的表面增强拉曼光谱的检测方法

权利要求书

1.一种基于交叉网状银纳米线AgNW检测海洋毒素GYM的表面增强拉曼光谱的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）制备SERS基底：将多元醇法合成的AgNW多次旋涂在硅片上，制得交叉网状银纳米线的SERS基底；

（2）检测SERS基底性能：以罗丹明R6G为拉曼探针检测步骤（1）基底的性能，留用性能合格者；所述性能包括增强效果、均匀性、重复性；

（3）确定毒素GYM特征峰；

（4）毒素GYM标准液的SERS光谱采集：在交叉网状银纳米线的SERS基底上分别滴加浓度从1nM -1μM的GYM标准液，干燥后进行GYM标准液的拉曼检测，得到GYM标准液的拉曼光谱；

（5）标准曲线的建立：首先通过适当的平滑、去噪音和基线校准处理降低荧光背景的干扰，提高信噪比，然后利用偏最小二乘法实现不同浓度毒素GYM拉曼光谱定标方程的拟合，建立毒素GYM浓度与特征峰拉曼信号强度之间的对应关系，获得毒素GYM浓度；

所述毒素GYM浓度与特征峰拉曼信号强度之间的对应关系为：

y=24.155x+20.602

其中，x代表毒素GYM浓度的对数，y代表GYM特征峰处的峰值强度，毒素GYM的定量线性范围为1nM - 1μM，拟合优度R²=0.9858，检测限为3.99×10^-10mol/L；

步骤（1）所述制备SERS基底的方法如下：

a、对硅片进行处理：将硅片放入浓硫酸和过氧化氢水溶液的混合溶液中，在70-80℃水浴锅中维持1-2小时，将羟基化的硅片浸泡在质量分数为3-5％的聚二烯基丙二甲基氯化铵（PDDA）水溶液中1-2小时，取出，高纯氮气吹干；

b、对基底进行处理：将多元醇法合成的AgNW滴在羟基化的硅片上后进行旋涂，重复3-5次，得到交叉网状银纳米线的SERS基底，超纯水清洗，真空干燥；

所述增强效果的检测方法：将罗丹明R6G溶解在甲醇中得混合液；将多元醇法合成的AgNW滴在硅片上后进行旋涂，得到具有不同厚度的交叉网状银纳米线的SERS基底，吸取混合液滴在厚度不同的交叉网状银纳米线的SERS基底上，观察SERS基底对罗丹明R6G的增强结果；

所述均匀性的检测方法：将罗丹明旋涂在交叉网状银纳米线的SERS基底上，干燥后进行拉曼成像测试，扫描的波长范围是400-2000cm^-1，获得若干光谱数据点，观察均匀性；

所述重复性的检测方法：将罗丹明旋涂在交叉网状银纳米线的SERS基底上，干燥后进行拉曼成像测试，扫描的波长范围是400-2000cm^-1，交叉网状银纳米线的SERS基底上随机采集不同位置处的罗丹明R6G分子的SERS光谱在特征峰1364cm^-1拉曼位移处的SERS分布强度，该特征峰处的强度在6760至11380之间波动，计算数据点的RSD，评价重复性。

2.根据权利要求1所述的基于交叉网状银纳米线AgNW检测海洋毒素GYM的表面增强拉曼光谱的检测方法，其特征在于：所述步骤（2）合格的标准为：数据点的RSD小于20%。

3.根据权利要求1所述的基于交叉网状银纳米线AgNW检测海洋毒素GYM的表面增强拉曼光谱的检测方法，其特征在于：步骤（4）所述拉曼检测的检测条件是：以交叉网状银纳米线的SERS基底为拉曼增强基底，将一定浓度的GYM溶液旋涂于增强基底上并烘干，选用LabRAM HR Evolution 共聚焦拉曼显微镜系统采集拉曼光谱，采集时间为5-10 s，每个样品分别在5个不同位置处采集拉曼光谱，取平均值作为最终结果，扫描的波数范围是300-900cm^-1。

4.根据权利要求1所述的基于交叉网状银纳米线AgNW检测海洋毒素GYM的表面增强拉曼光谱的检测方法，其特征在于：所述步骤（3）确定毒素GYM特征峰的过程为，将不同浓度下的GYM溶液旋涂于AgNW基底上进行拉曼检测，得到不同浓度下GYM标准溶液的拉曼光谱；同时将溶剂甲醇旋涂于同一批次的交叉网状银纳米线的SERS基底上作为对照进行拉曼检测；通过对比不同浓度的GYM、甲醇以及交叉网状银纳米线的SERS基底本身的拉曼光谱，确认GYM的定量特征峰为612.83 cm^-1。