[发明专利]一种柑橘属中药的在线活性筛选方法在审
| 申请号： | 202110863477.2 | 申请日： | 2021-07-29 |
| 公开（公告）号： | CN113720892A | 公开（公告）日： | 2021-11-30 |
| 发明（设计）人： | 曹君;闫天赐;乐紫璇;顾郁欣 | 申请（专利权）人： | 杭州师范大学 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447;G01N30/06;G01N30/88 |
| 代理公司： | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人： | 何俊 |
| 地址： | 311121 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 柑橘 中药 在线 活性 筛选 方法 | ||
1.一种柑橘属中药的在线活性筛选方法，其特征在于，采用电泳介导的微量分析法EMMA，在毛细管中用脂肪酶催化水解底物的一步反应，然后在紫外400nm处直接测定产物峰面积实现脂肪酶抑制剂的在线筛选，最后利用分子对接技术对脂肪酶抑制剂的筛选结果进行验证；
所述电泳介导的微量分析法包括以下步骤：
(1)预处理：将背景电解质溶液BGE预先注入毛细管；
(2)注射：先将脂肪酶溶液注入毛细管，再注入含或不含抑制剂的底物溶液；
(3)混合：施加+1.0kV电压使脂肪酶和底物溶液充分混合；
(4)孵化：毛细管在没有外部压力和电压的情况下静置；
(5)分离：恒定电压下将产物与未反应的底物分离。
2.根据权利要求1所述的一种柑橘属中药的在线活性筛选方法，其特征在于，步骤(1)所述BGE选自：硼砂、磷酸氢二钠、乙酸钠和Tris-HCl缓冲液中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种柑橘属中药的在线活性筛选方法，其特征在于，步骤(1)所述BGE的浓度为10-40mM。
4.根据权利要求1或2或3所述的一种柑橘属中药的在线活性筛选方法，其特征在于，步骤(1)所述BGE的pH为6.4-9.0。
5.根据权利要求1所述的一种柑橘属中药的在线活性筛选方法，其特征在于，步骤(2)所述底物溶液的制备方法为：将0.1％-0.2％(w/v)的4-硝基苯基月桂酸酯溶解在含有1％-2％Triton X-100的5-10mM醋酸钠中，并在沸水中加热帮助溶解，然后将溶液冷却至室温，制得底物溶液。
6.根据权利要求1或5所述的一种柑橘属中药的在线活性筛选方法，其特征在于，步骤(2)中毛细管每次进样后，进样端都要浸入去离子水中清洗。
7.根据权利要求1所述的一种柑橘属中药的在线活性筛选方法，其特征在于，步骤(3)所述混合的条件为：施加+1.0kV电压混合5-35s。
8.根据权利要求1所述的一种柑橘属中药的在线活性筛选方法，其特征在于，步骤(4)所述静置的时间为1-5min。
9.根据权利要求1所述的一种柑橘属中药的在线活性筛选方法，其特征在于，步骤(5)所述恒定电压为20-25kV。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于杭州师范大学，未经杭州师范大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110863477.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种具有空气净化功能的暖通空调过滤器
- 下一篇：一种肉鸡立体笼养方法
