[发明专利]一种CRP胶乳增强的试剂盒及其制备方法和应用

说明书

本发明公开一种CRP胶乳增强的试剂盒及其制备方法和应用，属于医疗产品和技术领域，所述CRP胶乳增强的试剂盒，包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R2包含如下成分：缓冲液1、缓冲液2、胶乳微球1、胶乳微球2、EDC、C反应蛋白抗体1、C反应蛋白抗体2、稳定剂、封闭剂。本发明通过控制投料用量、简化制备工艺得到均匀分散的试剂R2，得到的试剂盒灵敏度可达到0.15mg/L，而且还可以准确测定高浓度水平下的CRP含量，能够用于诊断各种感染性和炎症等疾病。

技术领域

本发明属于医疗产品和技术领域，具体涉及一种CRP胶乳增强的试剂盒及其制备方法和应用。

背景技术

C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)由肝细胞合成，在胎儿期产生，非母体胎盘传递。当机体受感染或组织损伤时巨噬细胞和其他白细胞等被激活，产生白细胞介素-6、白细胞介素-1、肿瘤坏死因子(TNF-a)等细胞因子及其他介导物，这些细胞因子和介导物到达肝脏，刺激肝细胞和上皮细胞合成CRP。

C反应蛋白因检测灵敏度性能的不同，可分为普通CRP、超敏CRP和全量程CRP。普通CRP临床上主要用于评价感染、组织损伤和炎症性疾病，同时为炎症性疾病的诊断提供数据支持，也为疾病的治疗和监控提供了诊疗信息。超敏CRP是诊断低水平炎症状态的灵敏指标，同时血清超敏CRP水平与动脉粥样硬化及急性脑梗死(ACI)等心脑血管疾病的发生、严重程度及预后也密切相关。全量程CRP可用于评估疾病活动性和疗效监控，也可用于预示健康人未来发生心血管疾病的概率，还可以用于评价疾病感染的程度。

现阶段，CRP试剂中R2的制备工艺中，耗时时间长，效率低下，原料损耗高，不利于产品扩大生产，不能达到量产的目的，在制作过程中需要离心去除游离的EDC、抗体等，需使用超声方式将胶乳颗粒进行分散重悬，以提高R2试剂性能；否则，若游离的EDC与抗体不能除去，将直接影响到试剂R2的性能，灵敏度、准确度降低，无法满足市场需求。

因此，现需研究一种工艺简洁的、高效的、一步法CRP胶乳增强的试剂盒及其制备方法和应用。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种CRP胶乳增强的试剂盒及其制备方法和应用，在CRP试剂中R2的制备工艺中，通过控制投料用量、简化制备工艺得到均匀分散的试剂R2，得到的试剂盒可以准确测定0.5mg/L以下低浓度水平的CRP含量，灵敏度可达到0.15mg/L，而且还可以准确测定高浓度水平下的CRP含量，能够用于诊断各种感染性和炎症等疾病。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种CRP胶乳增强的试剂盒，包含试剂R1和试剂R2，所述试剂R2包含如下浓度的成分：5-50mmol/L的缓冲液1、5-50mmol/L的缓冲液2、0.5-2g/L的胶乳微球1、0.5-2g/L的胶乳微球2、0.08-0.25g/L的EDC、0.03-0.08g/L的C反应蛋白抗体1、0.03-0.05g/L的C反应蛋白抗体2、15-40g/L的稳定剂、1.5-5.5g/L的封闭剂。EDC即为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。

进一步地，所述试剂R2中包含如下浓度的成分：50mmol/L的缓冲液1、50mmol/L的缓冲液2、2g/L的胶乳微球1、1g/L的胶乳微球2、0.15g/L的EDC、0.08g/L的C反应蛋白抗体1、0.05g/L的C反应蛋白抗体2、40g/L的稳定剂、2.5g/L的封闭剂。

进一步地，所述缓冲液1为Tris-HCl缓冲液、甘氨酸缓冲液、PBS缓冲液、Heppes缓冲液任一种；

所述缓冲液2为2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、Heppes缓冲液任一种。

进一步地，所述稳定剂为海藻糖或蔗糖或葡萄糖；所述封闭剂为牛血清白蛋白或酪蛋白。