[发明专利]柠檬苦素激活AMPK缓解非酒精性脂肪肝的方法

说明书

本发明公开了柠檬苦素激活AMPK缓解非酒精性脂肪肝的方法，包括以下步骤：试验动物的选取，动物选取C57BL/6小鼠；试验动物的分组，试验动物分为：正常饮食对照组、正常饮食柠檬苦素处理组、高脂饮食造模组、高脂饮食柠檬苦素处理组；试验动物的饲养；试验检测。本发明通过柠檬苦素喂养C57BL/6小鼠的试验方式发现，无论喂食正常热量饲料或高脂饮食，对照组和柠檬苦素处理组之间的食物摄入量均没有差异。我们观察到柠檬苦素处理高脂饮食的小鼠可引起明显的体重下降，而食用普通饲料的小鼠，在饲料中添加或者不添加柠檬苦素，小鼠的体重并无明显差异，从而表明高脂饮食喂养诱导的肝重增加可以通过柠檬苦素处理得以改善。

技术领域

本发明涉及非酒精性脂肪肝领域，特别涉及柠檬苦素激活AMPK缓解非酒精性脂肪肝的方法。

背景技术

非酒精性脂肪性肝病也被叫做代谢相关的脂肪性肝疾病，是一种以甘油三酯和其他脂质在肝细胞内病理性积聚为特点的疾病，它可以发展成非酒精性脂肪性肝炎和肝纤维化，后者最终会导致肝硬化和肝细胞癌。虽然有多种针对非酒精性脂肪肝的小分子化学药物正在进行临床试验，但目前临床上非酒精性脂肪性肝病的治疗选择还非常有限。

AMPK是细胞内感知能量状态、控制能量消耗和储存的关键代谢调节因子，有研究表明其活化对非酒精性脂肪性肝病有治疗作用，AMPK通过与AMP和ADP的结合而被激活，其激活状态会被ATP所抑制。肝脏特异性AMPK敲除可以造成肝脏脂质积累、脂肪变性、炎症、纤维化和肝细胞凋亡。已有的研究表明，有许多合成多酚可以激活肝脏AMPK，通过抑制固醇调节元件结合蛋白(SREBP)的活性抵抗肝脂肪变性。我们前期的研究表明类黄酮类化合物通过激活AMPK可以改善小鼠肝脏脂肪变性。

柠檬苦素是一种四环三萜类化合物，是植物中具有较高生物活性的次级代谢产物。很多中药和水果都富含柠檬苦素，它已被公认为药用食品中最有益和最有效的成分之一。近年来，许多药理研究发现柠檬苦素具有多种生物活性，包括抗肿瘤、抗炎、抗氧化以及保护肝脏等活性。柠檬苦素可以减少HepG2细胞内低密度脂蛋白胆固醇并调节小鼠体内与脂质代谢相关的基因表达。然而，柠檬苦素对于肝脏脂质代谢中的影响及其机制仍然未知，从而设计柠檬苦素激活AMPK缓解非酒精性脂肪肝的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供柠檬苦素激活AMPK缓解非酒精性脂肪肝的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：柠檬苦素激活AMPK缓解非酒精性脂肪肝的试验方法及应用，包括以下步骤：

步骤一：试验动物的选取，动物选取C57BL/6小鼠；

步骤二：试验动物的分组，试验动物随机分为4组：正常饮食对照组、正常饮食柠檬苦素处理组、高脂饮食造模组、高脂饮食柠檬苦素处理组；

步骤三：试验动物的饲养和药物处理，对试验动物进行正常饮食NCD饲料或高脂饮食HFD饲料喂养，加入或不加入柠檬苦素处理；

步骤四：试验检测，对试验动物进行取样，检测动物生理和代谢参数并进行对比，比较柠檬苦素对小鼠肝脏病理生理状态的影响。

优选的，步骤一中，动物选取C57BL/6小鼠若干只，且试验C57BL/6小鼠的年龄为8周龄，并对其称重记录数据，准备NCD饲料、HFD饲料和柠檬苦素，试验器具使用前需经过无菌处理。

优选的，步骤二中，对正常饮食对照组C57BL/6小鼠10只；

正常饮食柠檬苦素处理组C57BL/6小鼠10只；

高脂饮食造模组C57BL/6小鼠10只；

高脂饮食柠檬苦素处理组C57BL/6小鼠10只。

优选的，步骤三中，对正常饮食对照组C57BL/6小鼠10只进行NCD饲料喂养10周，并记录每日进食量；