[发明专利]一种利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法

权利要求书

1.一种利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法，其特征在于，步骤如下：将发酵结束后的纳他霉素发酵液通过离心收集上清液，得到纳他霉素发酵副产物；然后在纳他霉素发酵0～48h后，按照发酵培养基体积的2.5～7.5％，将纳他霉素发酵副产物添加至发酵培养基中，继续发酵，得纳他霉素。

2.如权利要求1所述的利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法，其特征在于，所述离心收集的条件为转速9000～11000rpm，时间12～18min。

3.如权利要求1所述的利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法，其特征在于，所述的纳他霉素发酵副产物中胆固醇氧化酶的酶活大于等于1U/mL；进一步优选为1.3～1.5U/mL。

4.如权利要求1所述的利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法，其特征在于，所述纳他霉素发酵生产所用菌株为褐黄孢链霉菌(Streptomyces gilvosporeus)、纳塔尔链霉菌(Streptomyces natalensis)、恰塔努加链霉菌(Streptomyceschattanoogensis)或利迪链霉菌(Streptomyces lydicus)。

5.如权利要求1所述的利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法，其特征在于，在纳他霉素发酵生产12～36h后添加纳他霉素发酵副产物；进一步优选为24h后。

6.如权利要求1所述的利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法，其特征在于，所述纳他霉素发酵的总时间为100～150h；进一步优选为120h。

7.如权利要求1所述的利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法，其特征在于，所述纳他霉素发酵副产物的添加量为发酵培养基体积的5％。

8.如权利要求1所述的利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法，其特征在于，具体包括步骤如下：

(1)将发酵结束后的纳他霉素发酵液通过离心收集上清液，得到纳他霉素发酵副产物；

(2)无菌条件下，取纳他霉素生产菌孢子涂布于琼脂斜面培养基中活化，然后将活化好的孢子刮入种子培养基中进行摇床培养，得种子液；

(3)将步骤(2)中的种子液按5～10％的接种量接入发酵培养基中，发酵培养，在发酵0～48h后，将步骤(1)收集的纳他霉素发酵副产物按照发酵培养基体积的2.5～7.5％添加至发酵培养基中，继续发酵72～120h，得纳他霉素。

9.如权利要求8所述的利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述琼脂斜面培养基的配方为葡萄糖5.0～15.0g/L，麦芽浸粉1.0～5.0g/L，酵母浸膏1.0～5.0g/L，蛋白胨3.0～10.0g/L，琼脂粉10.0～20.0g/L，pH 7.0～7.2；

所述种子培养基的配方为：葡萄糖10.0～30.0g/L，酵母浸膏3.0～10.0g/L，黄豆饼粉30.0～50.0g/L，pH 7.0～7.2；

所述摇床培养的条件为转速150～200rpm，温度26～30℃，培养时间36～48h。

10.如权利要求8所述的利用纳他霉素发酵副产物提高纳他霉素发酵产量的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述发酵培养基的配方为：大豆蛋白胨20g/L，酵母提取物4.5g/L，氯化钠2g/L，结晶硫酸镁1g/L，葡萄糖60g/L，pH 7.5。