[发明专利]光倒刺鲃的雄性分子标记及其应用

说明书

本发明公开了光倒刺鲃的雄性分子标记及其应用，所述雄性分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明还提供了特异性扩增分子标记的引物。本发明从光倒刺鲃中筛选获得了雄性特异性的分子标记，根据该分子标记设计的检测引物只能在光倒刺鲃雄性个体中扩增出目的条带，从而可以用该分子标记鉴定或辅助鉴定光倒刺鲃的性别。同时还提供了一种光倒刺鲃性别鉴别的方法。通过该技术可以快速、准确、便捷地鉴定光倒刺鲃的性别，特异性为100％，且对鱼体伤害较低，为光倒刺鲃性控育种和种质资源保护、改进与可持续利用提供帮助。

技术领域

本发明属于分子生物技术领域，具体涉及光倒刺鲃的雄性分子标记及其应用。

背景技术

光倒刺鲃(Spinibarbus hollandi)，隶属于鲤形目，鲤科，鲃亚科，倒刺鲃属。主要分布于中国的长江以南各个水系，是一种具有较高营养和药用价值的名优经济鱼类，深受市场和养殖户喜爱。然而，自20世纪80年代以来，由于各种人为因素导致光倒刺鲃的自然种群资源急剧下降，在我国许多江河已难觅踪迹。为保护这一水产种质资源，农业部先后在广东、广西、江西、福建、湖南、安徽等省建立了10多个光倒刺鲃国家级水产种质资源保护区。

光倒刺鲃的生长呈现性别二态性，在成鱼养殖阶段，雌鱼生长比雄鱼快。因此，探索光倒刺鲃性别分化的调控机制，建立全雌或高比例雌性光倒刺鲃培育新技术对其种质资源保护和开发利用具有重要的理论和实际意义。而性别特异分子标记的开发有助于准确快速获取表型，判断性别，从而开展人工繁殖和选育等工作，也有助于在商业生产中开展性别控制育种技术研究，进而建立单性体系。如今，尚无能够成功鉴定光倒刺鲃遗传性别的分子标记的报道，因此，开发一种准确鉴定遗传雄性的分子标记在光倒刺鲃人工繁育中具有极大的生产应用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可以准确鉴定雄性光倒刺鲃的分子标记。

本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供一种光倒刺鲃的雄性分子标记，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明的第二个方面，提供一种引物，扩增本发明第一方面所述的分子标记。

在本发明的一些实施方式中，所述引物为：

P20-F：5’-TGCAAACTGTCTGGCATTCTC-3’(SEQ ID NO.2)；

P20-R：5’-ATCTACTGCCCTCTGTCCTTT-3’(SEQ ID NO.3)。

本发明的第三方面，提供一种试剂盒，所述试剂盒包含本发明第二方面所述的引物。

本发明的第四方面，提供本发明第一方面所述分子标记或本发明第二方面所述引物或本发明第三方面所述试剂盒在用于鉴定或辅助鉴定雄性光倒刺鲃遗传性别中的应用。采用本发明第二个方面所述引物或本发明第三个方面所述试剂盒对光倒刺鲃进行检测，筛选出雄性光倒刺鲃的品种，有利于鉴定或辅助鉴定雄性光倒刺鲃遗传性别。

本发明的第五方面，提供本发明第一方面所述分子标记或本发明第二方面所述引物或本发明第三方面所述试剂盒在光倒刺鲃遗传育种中的应用。

本发明的第六方面，提供本发明第一方面所述分子标记或本发明第二方面所述引物或本发明第三方面所述试剂盒在光倒刺鲃种质资源改进中的应用。

本发明的第七方面，提供一种用于筛选雄性光倒刺鲃的方法，通过检测本发明第一方面所述分子标记，选择含有分子标记的个体。

在本发明的一些实施方式中，所述方法包括如下步骤：

(1)提取待检样品基因组DNA；

(2)以提取得到的DNA为模板，利用本发明第二方面所述的引物进行PCR扩增，得到PCR产物；