[发明专利]一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法在审
申请号: | 202110869854.3 | 申请日: | 2021-07-30 |
公开(公告)号: | CN113607940A | 公开(公告)日: | 2021-11-05 |
发明(设计)人: | 刘晓;毛勇辉;施有猛 | 申请(专利权)人: | 大陌检测技术(云南)有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/58;G01N33/53 |
代理公司: | 郑州欧凯专利代理事务所(普通合伙) 41166 | 代理人: | 陈凌 |
地址: | 650000 云南省昆明市滇*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 毒品 检测 量子 荧光 免疫 层析 方法 | ||
本发明涉及毒品检测技术领域,具体是一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法,具体包括四大步骤。本发明采用量子点荧光免疫层析方法,通过荧光阅读仪阅读检测线和质控线的荧光值,根据不同浓度毒品抗原的检测线和质控线荧光值的不同,得出检测线和质控线的比值,该比值对应毒品抗原的浓度做标准曲线,进而实现对传统毒品和新型毒品的快速检测,具有检测精准、灵敏度高的特点,应用范围高,适合广泛推广,为打击犯罪分子提供有力证据。
技术领域
本发明涉及毒品检测技术领域,具体是一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法。
背景技术
毒品一般是指使人形成瘾癖的药物,这里的药物一词是个广义的概念,主要指吸毒者滥用的鸦片、海洛因、冰毒等。
为了打击犯罪分子,通常需要对吸食毒品的涉案人员进行检测,目前使用较多的是金免疫层析和酶联免疫吸附法,但是这两种方法操作繁琐,对环境和操作人员的要求高,同时两者的灵敏度和精确度交底,进而经常导致吸食轻量毒品的不法分子脱网。因此,本领域技术人员提供了一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法,以解决上述背景技术中提出的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种用于毒品检测的量子点荧光免疫层析检测方法,涉及样品垫、结合垫、NC膜、吸水垫、PVC底板;
其检测方法如下:
步骤1:将毒品抗原制成液体并喷射在结合垫上,于35-38℃下干燥后形成量子点标记抗体;
步骤2:将SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体分别包被于NC膜上,于40-45℃下干燥后分别形成检测线和质控线;
步骤3:将样品垫、结合垫、NC膜、吸水垫按顺序组装于PVC底板上,组合成量子点免疫层析试纸;
步骤4:将样品溶液滴在样品垫上,在毛细虹吸作用下沿层析方向移动,在到达检测线和质控线时,通过荧光阅读仪阅读检测线和质控线的荧光值,根据不同浓度毒品抗原的检测线和质控线荧光值的不同,得出检测线和质控线的比值,该比值对应毒品抗原的浓度做标准曲线,进而实现毒品的检测。
作为本发明更进一步的方案:所述结合垫采用聚酯膜荧光垫。
作为本发明更进一步的方案:毒品抗原的制备方法如下:
S1、取50mg的BSA溶于0.13mol/L的NaHCO3中,制得BSA活化液,测定pH值为7.6;
S1、取1mg的毒品抗毒分子、1.073mg二环己基碳二亚胺、0.598mgN-羟基琥珀酰亚胺溶解于无水四氢呋喃中,在30-40℃下振荡24h后,于4000r/min下离心15min;
S1、离心后采用无水四氢呋喃洗涤沉淀2-3次,取上清液Ⅰ,待上清液Ⅰ中四氢呋喃挥发完全后,将残留物溶于0.2ml的二甲基甲酰胺中,沉淀后取上清液Ⅱ;
S1、将待上清液Ⅰ与上清液Ⅱ合并后缓慢滴入BSA活化液中,置入震荡器上,于15-25℃下震荡4h,进一步纯化得到毒品抗原。
作为本发明更进一步的方案:所述毒品抗毒分子采用吗啡抗体、冰毒抗体、K粉抗体或可卡因抗体。
作为本发明更进一步的方案:所述SD-BSA偶联物以及兔抗人多克隆抗体在使用前需采用缓冲液稀释至浓度为0.3-0.4mg/mL。
作为本发明更进一步的方案:所述缓冲液采用MES,pH值为4.5-5。
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