[发明专利]一种次氯酸根荧光探针及其制备方法和应用、次氯酸根的检测方法

说明书

本发明提供了一种次氯酸根荧光探针及其制备方法和应用、次氯酸根的检测方法，涉及生物化学材料技术领域。本发明提供的次氯酸根荧光探针对次氯酸根离子的灵敏度高、选择性好、响应速度快，检测结果准确。与现有的次氯酸荧光探针相比，本发明提供的次氯酸根荧光探针制备方法简单，检测试剂廉价，检测过程简便、快速，适宜推广应用。

技术领域

本发明涉及生物化学材料技术领域，具体涉及一种次氯酸根荧光探针及其制备方法和应用、次氯酸根的检测方法。

背景技术

在生物学上，活性氧(ROS)与生物体的疾病有关。作为一种活性氧物质，次氯酸根(ClO^-)在生物体内起着非常重要的作用。次氯酸根是由髓过氧化物酶(MPO)催化氧化反应氯离子(Cl^-)和过氧化氢(H₂O₂)而产生的活性氧。研究表明，体内正常含量的次氯酸根可维持基本的生命活动，同时在免疫系统中起到防御疾病的作用。然而，异常浓度的次氯酸根(≥1000mg/L)则会引起体内生物分子氧化，进而导致各种生理疾病，包括关节炎、动脉粥样硬化、肝硬化和癌症。因此，发展一种可靠、有效的次氯酸根检测和成像的方法具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种次氯酸根荧光探针及其制备方法和应用，本发明提供的次氯酸根荧光探针对次氯酸根离子的灵敏度高、选择性好、响应速度快，检测结果准确。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种次氯酸根荧光探针，具有式I所示结构：

本发明提供了上述技术方案所述次氯酸根荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

将4-吡啶乙腈和2-溴乙醇混合，进行亲核取代反应，得到具有式II所示结构的化合物；

将所述具有式II所示结构的化合物与9-蒽甲醛、碱催化剂混合，进行克脑文盖尔缩合反应，得到具有式I所示结构的次氯酸根荧光探针；

优选地，所述4-吡啶乙腈和2-溴乙醇的摩尔比为1:1～3。

优选地，所述亲核取代反应的温度为70～75℃；所述亲核取代反应的时间为6～8h。

优选地，所述具有式II所示结构的化合物和9-蒽甲醛的摩尔比为1:1～2。

优选地，所述克脑文盖尔缩合反应的温度在70℃以下；所述克脑文盖尔缩合反应的时间为5～6h。

本发明提供了上述技术方案所述次氯酸根荧光探针或上述技术方案所述制备方法制备得到的次氯酸根荧光探针在检测次氯酸根中的应用。

本发明提供了一种次氯酸根的检测方法，包括以下步骤：

将上述技术方案所述次氯酸根荧光探针或上述技术方案所述制备方法制备得到的次氯酸根荧光探针和待测样品混合，进行荧光检测。

优选地，所述次氯酸根荧光探针和待测样品混合的方法包括：将所述次氯酸根荧光探针溶于二甲基亚砜中，得到荧光探针储备液；将所述荧光探针储备液和乙腈/PBS缓冲溶液体系混合，得到荧光探针检测液；在所述荧光探针检测液中加入待测样品。

优选地，所述荧光检测包括荧光定性检测和荧光定量检测。

本发明提供了一种次氯酸根荧光探针，本发明提供的次氯酸根荧光探针对次氯酸根离子的灵敏度高，其检测限为0.19μm；选择性好，对次氯酸根离子专一响应而对其他离子和生物硫醇不响应；响应速度快，时间仅为2min。

本发明采用的次氯酸根荧光探针制备方法简单，检测试剂廉价，检测过程简便、快速，适宜推广应用。

附图说明