[发明专利]一种鉴定性连锁矮小基因的引物组及其应用

权利要求书

1.一种鉴定性连锁矮小基因的引物组，其特征在于，包括引物对1和引物对2；

所述引物对1的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述引物对1的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；

所述引物对2的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述引物对2的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。

2.权利要求1所述引物组在鉴定性连锁矮小基因携带鸡中的应用。

3.一种鉴定性连锁矮小基因携带鸡的试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂或试剂盒包括权利要求1所述的引物组。

4.一种鉴定性连锁矮小基因携带鸡的方法，其特征在于，包括以下步骤：

以样本鸡的基因组DNA或总RNA反转录得到的cDNA为模板，利用权利要求1所述引物组进行PCR扩增，得到扩增产物；

扩增产物的判断包括：当含有600bp～700bp的扩增产物时，则样本鸡为性连锁矮小基因的携带者。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述PCR反应程序包括：94℃预变性5min；94℃变性30s，58℃复性30s，72℃延伸40s，循环35次；72℃延伸5min。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系以20μL计，包括：PCR SuperMix 10μL，所述引物组中引物对1的正向引物和引物对2的正向引物各0.4μL，所述引物组中引物对1的反向引物和引物对2的反向引物各0.2μL，DNA模板2.5μL和剩余去离子水。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR SuperMix的浓度为10μmoL/L；所述引物组中引物对1的正向引物、引物对1的反向引物、引物对2的正向引物和引物对2的反向引物的工作浓度均为10μmoL/L；所述DNA模板的浓度为100ng/μL。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述判断的方法包括电泳或测序。

9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，扩增产物的判断还包括：当含有600bp～700bp的扩增产物和大于700bp且小于等于800bp的扩增产物时，则样本鸡为携带有性连锁矮小基因的杂合鸡；

当仅含有600bp～700bp的扩增产物时，则样本鸡为携带有性连锁矮小基因的纯合鸡；

当仅含有大于700bp且小于等于800bp的扩增产物时，则样本鸡为未携带有性连锁矮小基因的纯合鸡。

10.权利要求1所述引物组或权利要求3所述试剂或试剂盒或权利要求4～9任一项所述方法在辅助选育矮小鸡群新品种中的应用。